RB-Stachyose，罗丹明B水苏糖的反应机理

罗丹明B标记水苏糖（RB-Stachyose）是一类通过将罗丹明B荧光团与水苏糖（Stachyose）共价结合而制得的荧光糖衍生物。水苏糖是一种四糖，由两个半乳糖单元、一个葡萄糖和一个果糖通过特定的糖苷键（α-D-Gal-(1→6)-α-D-Gal-(1→6)-α-D-Glc-(1→2)-β-D-Fru）构成，广泛存在于植物中，属于棉子糖系列低聚糖。它不仅具有良好的亲水性和较强的溶解性，还参与植物碳水化合物运输与储存过程。罗丹明B作为常用荧光染料，具有高量子产率、发射光强稳定、光稳定性优良等特点。将两者结合可以同时实现糖链的分子识别功能与荧光可视化特征，从而拓展其在糖生物学研究中的应用价值。

在化学结构上，RB-Stachyose分子由水苏糖的多个羟基位点与罗丹明B的羧基或其衍生物进行反应而形成稳定的共价键。一般情况下，罗丹明B的羧基通过活化形成NHS酯（N-羟基琥珀酰亚胺酯）后，与水苏糖经过氨基化修饰的衍生物发生酰胺化反应，从而实现荧光团的引入。由于水苏糖分子主要含羟基而缺乏氨基，因此常需通过在糖分子一端进行氨基引入修饰（如通过还原胺化在还原端引入氨基基团），再与罗丹明B活化中间体进行偶联。这样可以避免非特异性的多位点反应，提高标记产物的均一性。

其反应机理主要涉及两类路径：

1. 酰胺化反应机理

在常用的RB-Stachyose合成路线中，罗丹明B首先通过碳二亚胺（如EDC）与NHS作用生成活化的罗丹明B-NHS酯。该活化酯在温和的水相或混合溶剂条件下（pH 7.4–8.5）易与伯胺基团反应。水苏糖分子经前期修饰后带有还原端伯胺，与NHS酯发生亲核进攻，氨基对酯羰基进行攻击，形成酰胺中间体并释放NHS作为离去基团。该过程选择性高、条件温和，不会破坏糖苷键结构，因此是制备RB-Stachyose的常见策略。

2. 酯化反应机理

另一种方式是利用罗丹明B羧基与水苏糖羟基的直接酯化反应。在该反应中，通常需要使用缩合剂（如DCC、EDC）和催化剂（如DMAP）促进酯键形成。其机理为缩合剂首先活化罗丹明B的羧基，形成活化酯中间体，随后水苏糖的羟基作为亲核试剂进攻羰基碳，生成酯键并释放副产物（如二环己基脲或EDC副产物）。这种方法无需额外引入氨基修饰，但产物可能存在多取代异构体，需要进一步纯化。

两类机理都遵循“亲核进攻—中间体形成—离去基团释放—稳定共价键生成”的基本反应规律。通过控制反应条件（如pH、温度、溶剂比例）可以调节标记效率与位点选择性。例如，酰胺化条件下常在室温（20–25 ℃）下进行反应，避免高温导致糖结构降解；而酯化反应则通常在无水有机溶剂中进行，并需惰性气氛保护以防止副反应发生。

合成完成后的RB-Stachyose产物可通过透析、凝胶过滤色谱或HPLC纯化，以去除未反应的罗丹明B和副产物。其表征常采用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱确认染料特性，结合质谱和NMR对糖链结构进行验证。

产品名称：RB-Stachyose，罗丹明B水苏糖

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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