FITC-D-Galactose，异硫氰酸荧光素标记D-半乳糖的反应条件

异硫氰酸荧光素标记D-半乳糖（FITC-D-Galactose）是一类由荧光素异硫氰酸酯（FITC, Fluorescein isothiocyanate）与单糖D-半乳糖通过化学偶联反应得到的荧光探针。D-半乳糖是自然界常见的己糖，分子中存在多个羟基基团及还原端的醛基或其衍生结构，可被进一步修饰为氨基糖或在特定位点引入伯胺官能团，以便与FITC发生共价结合。FITC分子骨架由三芳环共轭体系构成，光学性能优异，在近中性环境下具有高摩尔消光系数（~7.5 × 10⁴ M⁻¹·cm⁻¹）和强绿色荧光（激发波长495 nm，发射波长520 nm）。其活性基团异硫氰酸基（–N=C=S）具有较强的亲电性，能够与氨基化的半乳糖分子发生加成反应，形成稳定的硫脲键。通过这一修饰，产物既保持了半乳糖分子的亲水性与生物识别能力，又赋予其荧光标记功能，可用于细胞糖代谢研究、糖受体识别分析、糖-蛋白相互作用监测及分子示踪。该化合物通常以冻干粉末形式保存，水溶液应避光低温储存以保证荧光稳定性。

反应条件：

FITC-D-Galactose的合成需要合理控制反应条件，以保证荧光基团的稳定性和结合效率。首先，前体D-半乳糖需经过前期修饰，通常采用还原胺化（Reductive amination）方法在还原端引入伯胺基团，例如以氨基化试剂（乙二胺、氨水）在钠氰硼氢化物存在下反应，从而得到带有伯胺的半乳糖衍生物。此步骤确保糖分子具备与FITC偶联的活性位点。随后，进行FITC标记反应：

1）溶剂选择：常采用混合溶剂体系，如碳酸氢盐缓冲液（0.1 M NaHCO₃，pH 8.3）与少量DMSO或DMF的混合体系。水相保证半乳糖衍生物的溶解性，DMSO/DMF则提高FITC的溶解度。

2）pH条件：反应体系需维持在弱碱性环境（pH 8.0–9.0）。在此条件下，伯胺保持较高的去质子化比例，亲核性增强，有利于与FITC的–N=C=S基团反应。同时弱碱条件也能避免FITC在酸性条件下分解或荧光淬灭。

3）温度与时间：通常在室温（20–25 ℃）避光条件下搅拌反应，反应时间为4–12小时。若希望提高反应效率，可在轻微升温（30–37 ℃）条件下进行，但过高温度可能导致FITC降解或副反应增加，因此需平衡效率与产率。

4）摩尔比：反应物比例一般为FITC：氨基半乳糖 = 2:1或3:1，以确保半乳糖分子上的氨基位点充分与FITC反应，同时通过后续纯化去除未反应的FITC。

5）反应监控：反应过程可通过薄层色谱（TLC，荧光检测）或高效液相色谱（HPLC）监控，FITC标记产物通常表现出明显的绿色荧光带。

6）纯化方法：反应完成后需去除过量FITC和副产物。常用方法包括透析（分子量截断1000–3000 Da）、凝胶过滤层析（Sephadex G-25）或反相HPLC纯化。所得产物通常以冻干粉末形式保存。

7）表征与验证：产物的化学结构可通过ESI-MS、MALDI-TOF确认分子量，¹H NMR（若溶解性允许）用于分析硫脲键生成，紫外-可见吸收光谱与荧光光谱用于验证FITC标记的光学特性。

在实验应用中，FITC-D-Galactose的溶液制备需要避光，且推荐溶于PBS、HEPES或Tris缓冲液。若需长期储存，建议冻干后在-20 ℃保存，并在使用前现配水溶液以保持荧光活性。

产品名称：FITC-D-Galactose

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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