FITC-L-Fucose,异硫氰酸荧光素标记L-岩藻糖的合成过程
FITC-L-Fucose 是通过将绿色荧光团 FITC(Fluorescein isothiocyanate)与 L-岩藻糖偶联得到的功能性糖衍生物。L-岩藻糖是一种六碳脱氧糖,C6 位缺失羟基,具有的生物识别功能。在合成 FITC-L-Fucose 时,需要引入氨基衍生物作为 FITC 偶联位点,通过异硫氰酸基与氨基形成硫脲键,从而得到荧光标记产物。
1. 合成过程
氨基化岩藻糖:
L-Fucose 的结构不含伯胺,因此首先需要在 C1 位或还原端羟基通过氨基化方法引入氨基。常用策略包括羟基保护、硝基化/氨化、脱保护等步骤,确保氨基位点特异性并可与 FITC 反应。
FITC 偶联反应:
氨基化岩藻糖溶解于弱碱性缓冲液(pH 8–9),使氨基去质子化,提高亲核性;
FITC 溶解于 DMSO 或 DMF 中,缓慢加入反应体系,室温搅拌 2–12 小时,避光操作;
异硫氰酸基与氨基亲核加成,形成稳定硫脲键,实现荧光标记。
反应优化:
pH 调控:确保氨基活性,同时避免糖结构破坏;
摩尔比调整:FITC 与氨基化 L-Fucose 摩尔比可控制标记程度,通常 1:1 至 3:1;
温度与光照控制:FITC 光敏感,操作中需避光,避免温度过高引起糖或荧光团降解。
2. 纯化过程
凝胶过滤(Sephadex/G-25):通过分子量差异去除游离 FITC 和低分子杂质;
高效液相色谱(HPLC):采用反相 C18 柱或亲水相色谱进行纯化,通过荧光检测(λ_ex = 488 nm,λ_em = 520 nm)监控产物,得到高纯度 FITC-L-Fucose;
透析或超滤:去除盐类和小分子副产物,保证水溶液纯度;
纯化评价:质谱(MS)确认分子量,NMR 验证硫脲键和糖骨架完整性,荧光光谱评价标记效果。
3. 应用价值
纯化后的 FITC-L-Fucose 保留糖的生物识别性,可用于:
研究糖-蛋白相互作用,如岩藻糖结合 lectins;
荧光追踪糖代谢及运输;
药物递送载体功能化,提供可视化信号;
化学反应机理研究及糖衍生物验证。
产品名称:FITC-L-Fucose,异硫氰酸荧光素标记L-岩藻糖
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09