FITC-NH2,异硫氰酸荧光素标记氨基的反应机制名称:
FITC-NH2 是通过荧光团 FITC(Fluorescein isothiocyanate)与伯胺基团形成共价键的功能性标记分子,主要用于生物大分子(蛋白质、多肽、氨基糖等)的荧光标记。其化学特性核心在于异硫氰酸基(–N=C=S)与氨基的亲核加成反应,形成稳定的硫脲键。
1. 化学结构与活性位点
FITC 具有苯环荧光核心和异硫氰酸基;
伯胺(–NH2)为亲核官能团,可与 FITC 的异硫氰酸基发生化学反应;
反应生成的硫脲键具有高度稳定性,不易水解,适合生物体系使用。
2. 反应机制
亲核加成
伯胺提供孤电子对,攻击 FITC 异硫氰酸基的碳原子;
形成中间体,碳与氮之间形成新 σ 键,硫原子被保留;
该步骤受 pH 条件控制,弱碱性环境(pH 8–9)可使氨基去质子化,提高亲核性。
硫脲键形成
中间体重排,终生成 R–NH–C(=S)–R’ 硫脲键;
该键在水溶液和缓冲液中稳定,保证标记分子荧光特性和化学稳定性;
反应速率与氨基浓度、温度、溶剂性相关。
选择性与特异性
FITC 异硫氰酸基主要与伯胺反应,不易与羟基、羧基、巯基发生非特异性反应;
可控摩尔比和缓冲条件可实现单标记或多标记策略,保证生物大分子功能完整。
3. 反应操作条件
pH:弱碱性(pH 8–9)适宜;
溶剂:水-有机混合体系(PBS+DMSO)兼顾氨基溶解性与 FITC 溶解性;
温度:室温或低温,避免高温导致荧光团降解;
避光:防止 FITC 光漂白,保证荧光稳定性。
4. 应用优势
荧光标记:FITC-NH2 可直接标记蛋白质、多肽、核酸等分子,实现实时可视化;
化学稳定性强:硫脲键稳定,不易水解,适用于长期实验或体外成像;
可调控标记程度:摩尔比调控可实现单一或多位标记,保证生物活性;
适用:适合生物成像、药物载体表面修饰、荧光定量分析及分子相互作用研究。
产品名称:FITC-NH2,异硫氰酸荧光素标记氨基
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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