产品名称:BHQ-1 acid
CAS:1190431-95-8
BHQ-1 acid(CAS 号 1190431-95-8)是黑洞猝灭剂(BHQ)家族中针对短波长荧光染料的羧基功能化衍生物,核心定位是 “短波长区可灵活修饰的暗猝灭剂”,凭借羧基基团的反应多样性与高效的猝灭性能,成为短波长荧光探针制备、生物分子修饰及高灵敏度检测领域的基础工具试剂。其分子结构由 BHQ-1 猝灭母体与羧基连接臂组成:BHQ-1 母体通过特定的芳香共轭体系,实现对短波长荧光的高效吸收;羧基连接臂(通常为 C6-C8 柔性烷基链)不仅提供了活性反应位点,还通过柔性设计减少了 BHQ-1 与目标分子间的空间位阻,确保偶联后两者功能不受影响 —— 既维持 BHQ-1 的高猝灭效率,又保留生物分子(如核酸、蛋白、小分子探针)的活性与构象完整性。
光谱性能上,BHQ-1 acid 的吸收光谱范围集中在 480-580nm,最大吸收峰约为 534nm,与短波长荧光报告基团(如 FAM、FITC、Alexa Fluor 488、Cy2 等)的发射光谱高度匹配,可通过 Förster 共振能量转移(FRET)或光诱导电子转移(PET)机制实现高效猝灭。其核心优势在于 “暗猝灭” 特性 —— 自身无荧光发射,吸收的荧光能量完全以热能形式耗散,避免了传统猝灭剂(如 TAMRA 作为猝灭剂时的弱荧光干扰)带来的背景信号,猝灭效率可达 92% 以上,显著提升检测的信噪比。此外,其吸收带宽较宽(约 100nm),即使荧光染料的发射峰因溶剂、pH 或偶联环境略有偏移,仍能保持稳定的猝灭效果,适配性强,降低了实验中光谱匹配的难度,尤其适合多色荧光标记实验(与中长波长探针无光谱交叉)。
偶联反应的灵活性是 BHQ-1 acid 的关键价值。其羧基(-COOH)基团可通过多种化学反应与目标分子结合,适配不同活性基团的生物分子:与含氨基(-NH₂)的分子(如 DNA/RNA 探针、抗体、多肽、蛋白质)反应时,需在缩合剂(如 EDC・HCl、DCC,常搭配 NHS 活化以提升反应效率)作用下形成稳定的酰胺键,反应条件温和(pH 5.5-7.5、室温孵育 1-2 小时),偶联率通常 > 80%,且对生物分子的活性影响极小(如抗体偶联后仍保持抗原结合能力,核酸探针偶联后仍能正常杂交);与含羟基(-OH)的分子(如小分子药物、糖类、脂质、纳米颗粒表面羟基)反应时,在酸催化剂(如 DMAP、对甲苯磺酸)作用下可形成酯键,适用于修饰药物分子或生物材料,制备兼具荧光示踪与治疗功能的探针;此外,羧基还可通过点击化学反应(如与叠氮基在 Cu (I) 催化剂下发生环加成反应)修饰含对应活性基团的分子,进一步拓展了其应用场景,尤其适合复杂生物分子的定点修饰(如核酸链的特定碱基位点标记)。
应用领域上,BHQ-1 acid 是短波长荧光探针制备的核心试剂,广泛用于科研与临床诊断。在分子生物学研究中,可与含氨基的荧光报告基团(如 FAM)共同修饰核酸探针,制备双标记分子信标(Molecular Beacon),用于活细胞内 mRNA 的实时监测(如胚胎发育过程中基因的时空表达、肿瘤细胞内癌基因的活性变化),或制备高特异性的荧光原位杂交(FISH)探针,用于染色体微小缺失或重复的检测;在临床诊断中,可修饰含氨基的核酸探针,用于实时荧光定量 PCR(qPCR)的 TaqMan 探针,检测病原体(如新冠病毒、流感病毒、乙肝病毒)或肿瘤标志物基因(如 EGFR、p53 突变),其高猝灭效率可降低检测背景,提升对低浓度模板的检出能力(检测限可达皮摩尔 pM 级别);在免疫分析中,可偶联到含氨基的抗体上,制备荧光免疫探针,用于流式细胞术(检测免疫细胞亚型,如 CD4+T 细胞、CD8+T 细胞)、免疫印迹(Western Blot)或免疫组化(IHC,检测组织中的蛋白表达,如 Ki-67 增殖指数),尤其适合多色荧光分析(如同时检测多种细胞表面标志物);在细胞生物学研究中,可修饰到含氨基的细胞骨架探针(如肌动蛋白结合肽)或细胞器靶向分子(如线粒体靶向肽)上,制备荧光示踪探针,实时观察细胞内结构的动态变化(如细胞分裂、细胞器运动);在食品安全与环境检测中,可修饰到含氨基的适配体或酶上,制备荧光传感器,用于检测农药残留(如拟除虫菊酯)、重金属离子(如 Cd²+、As³+)或微生物(如大肠杆菌、李斯特菌),满足快速、现场检测的需求。
储存与使用方面,BHQ-1 acid 对光、湿度敏感,需在 - 20℃、避光、干燥、密封条件下保存,固体状态下保质期约 12-24 个月,开封后需尽快使用,避免长期暴露在空气中导致羧基水解或吸附水分;溶解时需选用无水非质子性有机溶剂(如 DMSO、DMF),不可直接用水溶解(羧基解离会降低反应活性),储备液浓度一般配制为 10mM,现配现用,未用完的储备液需分装为小体积(如 10-50μL),-80℃冷冻保存,避免反复冻融(反复冻融会导致溶剂挥发,浓度变化,影响偶联效率);与生物分子偶联前,若目标分子的氨基活性较低(如某些修饰后的多肽或核酸),建议先将 BHQ-1 acid 的羧基用 NHS 活化(室温孵育 30 分钟,形成 NHS 酯中间体),再与目标分子反应,可显著提升偶联效率(偶联率可提升至 90% 以上);偶联后需通过透析(使用截留分子量 3kDa 或 10kDa 的透析袋,以去除小分子杂质)、凝胶过滤层析(如 Sephadex G-25 柱)或离心超滤等方法去除未反应的游离猝灭剂、缩合剂及 NHS 等杂质,确保探针纯度,避免背景荧光干扰。其偶联产物在生理缓冲液(pH 7.0-7.4)中稳定性良好,可在 4℃短期储存(1-2 周)或 - 80℃长期储存(6-12 个月),反复冻融 3-5 次后仍能保持稳定的猝灭效率,适用于大多数体外实验体系(如细胞培养、溶液相检测、微孔板检测),是科研与临床诊断中性价比极高的短波长猝灭剂试剂。
产地:西安
规格:50mg 100mg 500mg
纯度:95%
状态:固体/粉末
储藏条件:冷藏
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!
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小编:HLL 2025年9月28日