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FITC-Sodium Alginate,异硫氰酸荧光素标记海藻酸钠的制备方法概述
发布时间:2025-09-30     作者:axc   分享到:

FITC-Sodium Alginate,异硫氰酸荧光素标记海藻酸钠的制备方法概述

异硫氰酸荧光素标记海藻酸钠(FITC-Sodium Alginate)是一类典型的荧光多糖衍生物,结合了多糖海藻酸钠的生物相容性与荧光素异硫氰酸酯(FITC)的荧光特性。海藻酸钠(Sodium Alginate)是一种来源的阴离子多糖,由褐藻(如海带、巨藻)中提取,分子结构主要由β-D-甘露糖醛酸(Mannuronic acid, M)和α-L-古洛糖醛酸(Guluronic acid, G)两种单元按不同方式线性连接而成,具有良好的水溶性、胶凝特性和生物相容性。将FITC与海藻酸钠偶联后,产物不仅保留了多糖的生物学功能(如金属离子螯合、凝胶形成、细胞黏附和生物相容性),同时赋予其绿色荧光信号,使其在生物成像、药物载体可视化、细胞摄取机制研究和药代动力学分析中具有应用。

制备方法概述

FITC-Sodium Alginate的制备通常依赖于FITC的异硫氰酸基团(–N=C=S)与海藻酸钠分子链上的羟基或通过引入氨基后形成的氨基进行反应。由于海藻酸钠本身以羧基和羟基为主,缺乏活泼氨基,因此在标记前往往需要先进行“氨基化”处理,使其具备可供FITC结合的位点。

1. 海藻酸钠的氨基化修饰

常用方法是采用碳二亚胺化学(如EDC/NHS)将海藻酸钠的羧基与乙二胺(EDA)或六亚甲基二胺(HMDA)偶联,在多糖主链上引入–NH₂官能团。

该过程一般在弱酸性或中性条件下进行,反应后得到氨基化海藻酸钠(Amine-modified Sodium Alginate)。

2. FITC标记反应

在碱性缓冲液(如pH 9.0的碳酸氢钠缓冲液)中,FITC可与氨基化海藻酸钠上的–NH₂基团发生异硫氰酸酯反应,形成稳定的硫脲键(–NH–C(=S)–NH–)。

反应一般在避光条件下进行,以防FITC光漂白,常温搅拌数小时至过夜。

为提高标记效率,可以控制FITC与海藻酸钠氨基的摩尔比,同时适当延长反应时间。

3. 纯化与干燥

反应完成后,体系中含有未反应的游离FITC和副产物,需要通过透析袋(截留分子量10–20 kDa)进行长时间透析,去除小分子杂质。

透析产物经冷冻干燥(lyophilization)后得到FITC-Sodium Alginate粉末,保存于避光条件下。

技术要点

pH控制:FITC在碱性条件下反应活性高,但碱度过强会导致海藻酸钠降解,需在pH 9左右平衡。

摩尔比优化:常用FITC与氨基的摩尔比为1:5–1:10,以确保标记均一性。

表征方法:利用紫外-可见吸收光谱检测FITC的特征峰(490 nm左右),荧光光谱检测发射峰(约520 nm),并可通过核磁共振(NMR)、傅里叶红外光谱(FTIR)确认化学键合。

产品名称:FITC-Sodium Alginate,异硫氰酸荧光素标记海藻酸钠

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

FITC-Sodium Alginate

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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