FITC-Wogonoside，异硫氰酸荧光素标记汉黄芩苷的合成思路

汉黄芩苷（Wogonoside）是一种黄酮类配糖体，主要存在于中药黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的根部。它由苷元汉黄芩素（Wogonin）与葡萄糖醛酸通过糖苷键连接而成，分子结构中含有多个酚羟基和糖基部分。汉黄芩苷因其抗氧化、清除自由基和生物活性而受到关注，但其应用受到溶解性和可视化不足的限制。通过与异硫氰酸荧光素（FITC）标记，可制备得到FITC-Wogonoside，其兼具黄酮苷的生物功能与FITC的绿色荧光信号，适合用于细胞成像、代谢途径研究及配体结合实验。

合成思路

FITC分子带有异硫氰酸基团（–N=C=S），通常与氨基反应生成稳定的硫脲键。然而汉黄芩苷分子本身缺乏游离氨基，因此需要先对其进行化学衍生化，常见方法是通过引入氨基功能化基团，从而为FITC提供偶联位点。

合成步骤

步：汉黄芩苷活化与修饰

汉黄芩苷中含有羟基（–OH），可以利用碳二亚胺（如EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化方法，引入羧基中间体。

将活化后的汉黄芩苷与乙二胺（EDA）反应，使得分子上引入伯氨基（–NH₂）。这样得到氨基化汉黄芩苷衍生物，为后续偶联FITC提供反应基团。

第二步：FITC标记反应

将氨基化汉黄芩苷溶于碳酸氢钠缓冲液（pH 9.0），FITC溶解于少量DMSO或DMF中，然后缓慢加入到溶液中。

异硫氰酸酯基团（–N=C=S）与伯氨基发生亲核加成反应，生成硫脲键（–NH–C(=S)–NH–）。

反应条件需避光、室温搅拌，通常持续12–24小时。

第三步：产物纯化

将反应液放入分子量截留10–20 kDa的透析袋中，在去离子水中透析48小时以上，期间频繁更换透析液以去除游离FITC和小分子杂质。

经冷冻干燥得到绿色荧光粉末，即FITC-Wogonoside。

第四步：表征分析

紫外-可见光谱：检测490 nm左右的FITC特征吸收峰。

荧光光谱：观察520 nm发射峰，确认荧光性能。

红外光谱（FTIR）：检测硫脲键的特征吸收峰。

核磁共振（NMR）：进一步验证修饰位置及结构变化。

技术要点

缓冲液选择：推荐碳酸氢钠或NaHCO₃缓冲液，以维持弱碱性环境。

溶剂配比：FITC易溶于DMSO，但DMSO比例过高会影响多糖或苷类稳定性，需保持在总体积10%以下。

摩尔比控制：常采用FITC与氨基比例为1:5至1:10，以避免过度交联或荧光猝灭。

产品名称：FITC-Wogonoside，异硫氰酸荧光素标记汉黄芩苷

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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