FITC-Pilocarpine，异硫氰酸荧光素标记毛果芸香碱的结构表征

FITC-Pilocarpine 是通过异硫氰酸荧光素（Fluorescein Isothiocyanate，FITC）与毛果芸香碱（Pilocarpine）偶联形成的荧光标记小分子。Pilocarpine分子中包含次级氨基及多个羟基，为FITC偶联提供了亲核位点。FITC的异硫氰酸基团（–N=C=S）可与胺类发生亲核加成，生成稳定的氨基异硫氰酸酯（thiourea）键，从而将荧光团固定在Pilocarpine分子上，实现可追踪的标记。

在纯化阶段，由于反应体系中可能存在未反应的FITC、偶联产物以及少量副产物，需采用高效纯化方法获得高纯度产物。常用方法包括硅胶柱色谱和高效液相色谱（HPLC）。硅胶柱色谱通常采用梯度洗脱体系，通过极性或疏水性差异将FITC-Pilocarpine与未反应FITC分离。HPLC则可提供更精确的分离，结合荧光检测器监控FITC标记物的存在，有助于实时评估纯化效果。纯化后的FITC-Pilocarpine呈黄色至橙色固体或粉末，具有一定水溶性，可溶于有机溶剂及含少量缓冲液的水溶液。

结构表征方面，核磁共振（^1H-NMR、^13C-NMR）可用于确认FITC与Pilocarpine偶联位置，同时验证分子结构完整性。质谱（MS）为分子量提供精确数据，可进一步确认偶联产物的生成。紫外-可见光谱显示FITC-Pilocarpine在约495 nm处具有吸收峰，而荧光光谱在约520 nm处发射，说明荧光性能保持稳定。通过这些手段，可以有效区分FITC-Pilocarpine与未反应FITC或其他副产物，保证实验使用的可靠性。

在实验应用中，纯化后的FITC-Pilocarpine可用于细胞摄取研究、荧光成像以及小分子转运分析。其荧光性质允许在荧光显微镜下实时观察Pilocarpine的分布，而纯化后的高纯度特性确保了实验结果的可重复性和稳定性。制备过程中控制pH、温度和避光条件，也是保证产物稳定性的重要因素。

综上，FITC-Pilocarpine的纯化与表征流程包括色谱分离、荧光检测、NMR和MS结构确认以及光谱性能验证。这些环节确保了偶联产物的结构完整性和荧光功能，为Pilocarpine相关的生物化学实验提供可靠的标记工具。

产品名称：FITC-Pilocarpine，异硫氰酸荧光素标记毛果芸香碱

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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