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FITC-Lignoceric Acid,异硫氰酸荧光素标记木焦油酸的合成过程
发布时间:2025-10-09     作者:axc   分享到:

FITC-Lignoceric Acid,异硫氰酸荧光素标记木焦油酸的合成过程

FITC-Lignoceric Acid 是由长链饱和脂肪酸木焦油酸(Lignoceric Acid, C24:0)与异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate,FITC)偶联形成的荧光标记分子。木焦油酸分子结构中含有24个碳的饱和链和末端羧基,具有良好的疏水性及膜结合潜能;FITC则通过其异硫氰酸基(–N=C=S)实现与含氨基底物的特异性共价连接,使脂肪酸获得荧光功能化,实现可视化追踪和分析。

由于木焦油酸羧基本身缺乏与FITC直接反应的能力,通常先将其活化并引入氨基衍生物。常用方法是通过EDC(1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺)/NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)体系,将羧基转化为NHS酯中间体。NHS酯对胺类具有良好的亲核活性,可在温和条件下与短链伯胺或仲胺反应,生成木焦油酸-胺衍生物(Lignoceric Acid-Amine)。此步骤保持长链结构完整,避免高温或强酸碱条件对脂肪酸骨架的破坏。

随后,将脂肪酸-胺衍生物溶解于弱碱性缓冲液(pH 8.0–9.0)中,加入FITC。FITC的异硫氰酸基对胺基进行亲核加成反应,形成稳定的氨基异硫氰酸酯(thiourea)键。反应一般在室温避光条件下进行,以降低FITC光降解或副反应的风险。反应时间可根据转化效率调整,通常为数小时至过夜,以确保偶联产物生成。

合成过程中,由于反应体系中存在未反应FITC和副产物,需要通过精细纯化获得高纯度FITC-Lignoceric Acid。纯化方法常采用硅胶柱色谱或高效液相色谱(HPLC),利用脂肪酸疏水性或极性差异实现分离,并通过荧光检测确认目标产物。纯化后的FITC-Lignoceric Acid呈黄色至橙色固体,具备一定水溶性或可溶于含少量有机溶剂的缓冲体系。

结构表征方面,^1H-NMR和^13C-NMR可确认FITC与脂肪酸胺衍生物的偶联位点及骨架完整性,质谱(MS)则提供分子量数据,进一步验证偶联产物。紫外-可见光谱显示FITC-Lignoceric Acid在约495 nm处具有吸收峰,而荧光光谱在约520 nm发射光,表明荧光性质完整。通过这些手段,可以确保产物结构完整且光学性能稳定。

该偶联分子在实验中可用于脂质膜研究、脂肪酸代谢追踪及细胞成像等应用。结构合成策略通过木焦油酸羧基活化、胺衍生化、FITC偶联以及纯化表征,形成稳定的thiourea连接键,实现脂肪酸与荧光团的有效结合。整个过程保持了脂肪酸骨架的完整性,确保荧光团性能不受影响,为脂质化学及生物实验提供可靠的可视化工具。

综上所述,FITC-Lignoceric Acid 的结构合成包括羧基活化、胺化衍生化、FITC偶联、反应条件优化以及纯化与表征等环节。通过控制反应温度、pH及避光条件,可获得结构完整、荧光性能稳定的偶联产物,为脂肪酸相关的荧光追踪、膜结合实验及分析研究提供可靠的化学工具。该方法兼顾了化学效率与产物功能性,是脂质标记与研究领域常用的合成策略。

产品名称:FITC-Lignoceric Acid

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

FITC-Lignoceric Acid

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