FITC-Lignoceric Acid,异硫氰酸荧光素标记木蜡酸的合成及纯化过程
FITC-Lignoceric Acid 是由长链饱和脂肪酸木蜡酸(Lignoceric Acid, C24:0)与异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate,FITC)偶联形成的荧光标记分子。木蜡酸分子结构中含有24个碳的直链饱和骨架及末端羧基,FITC通过其异硫氰酸基(–N=C=S)与含胺基底物共价连接,实现脂肪酸的荧光化改性。该偶联分子可用于脂质膜研究、脂肪酸追踪及荧光分析实验,为脂质化学研究提供可视化工具。
由于木蜡酸羧基本身不具备与FITC直接反应的能力,需要通过化学改性引入可反应的胺基。常用策略是利用EDC(1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺)/NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)体系,将木蜡酸羧基活化为NHS酯中间体。NHS酯具有良好的亲核性,可在温和条件下与伯胺或仲胺反应,生成木蜡酸-胺衍生物(Lignoceric Acid-Amine)。该步骤在室温有机溶剂中进行,以避免高温或强酸碱条件对长链脂肪酸骨架产生破坏,同时保持脂肪酸的疏水性和化学完整性。
随后,将木蜡酸-胺衍生物溶解于弱碱性缓冲液(pH 8.0–9.0)中,加入FITC。FITC的异硫氰酸基与胺衍生物的伯胺或仲胺发生亲核加成反应,形成稳定的氨基异硫氰酸酯(thiourea)键。反应通常在室温避光条件下进行,以防FITC光降解或产生副反应。反应时间可根据转化效率调控,一般为数小时至过夜,保证偶联产物形成。
反应完成后,体系中含有FITC-Lignoceric Acid、未反应的FITC及少量副产物。为获得高纯度产物,需进行精细纯化。纯化方法包括硅胶柱色谱和高效液相色谱(HPLC)。硅胶柱色谱可利用脂肪酸疏水性差异进行分离,HPLC则提供更高分辨率,通过极性或疏水性梯度洗脱实现目标产物分离,并可结合荧光检测实时监控FITC标记物的分布。纯化后的FITC-Lignoceric Acid通常呈黄色至橙色固体,具备一定水溶性或可溶于含少量有机溶剂的缓冲液。
结构表征包括核磁共振(^1H-NMR、^13C-NMR)验证偶联位点及骨架完整性,质谱(MS)提供分子量信息确认偶联产物。紫外-可见光谱显示FITC-Lignoceric Acid在约495 nm处有吸收峰,荧光光谱在约520 nm处发射光,表明荧光性能保持稳定。这些表征手段能够确认产物结构的完整性与功能性,为下游实验提供可靠保证。
合成及纯化过程中,应严格控制反应温度、pH及避光条件,以防FITC降解或副反应产生。同时,选择适当溶剂体系和纯化方法,保证脂肪酸长链骨架和荧光团性能不受影响。整个流程包括木蜡酸羧基活化、胺衍生化、FITC偶联、反应条件优化及纯化表征,确保获得结构完整、荧光性能良好的偶联产物。
综上所述,FITC-Lignoceric Acid 的合成及纯化策略以化学效率和产物功能性为核心,通过形成稳定的thiourea键,实现脂肪酸与FITC的有效结合,为脂质研究、荧光追踪及分析实验提供可靠的可视化工具。其制备方法兼顾结构完整性、荧光性能稳定性及实验适用性,是脂肪酸标记研究中常用的技术路线。
产品名称:FITC-Lignoceric Acid
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09




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