FITC-Lysozyme，异硫氰酸荧光素标记溶菌酶的反应活性

产品名称：FITC-Lysozyme

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

FITC-Lysozyme 是通过异硫氰酸荧光素（Fluorescein Isothiocyanate, FITC）与溶菌酶（Lysozyme, Lyz）共价偶联形成的荧光标记蛋白衍生物。溶菌酶是一种小分子量（约14.3 kDa）的碱性蛋白，广泛存在于鸡蛋白及人体多种分泌液中，具有特定的多糖底物结合活性。FITC 偶联后，溶菌酶获得绿色荧光信号（激发约495 nm，发射约520 nm），可用于分子示踪、细胞实验及反应机制研究，同时保留其结构完整性和部分生物活性。

1. 化学偶联机制与反应活性
   FITC 的化学反应活性来源于其异硫氰酸基（–N=C=S），这一活性基团对亲核试剂，尤其是蛋白质的伯胺（如赖氨酸ε-氨基或N端氨基）具有高度选择性。在偶联过程中：

   由于溶菌酶分子较小且赖氨酸数量有限，FITC 偶联密度可精确控制，从而在保证荧光信号的前提下，尽量保留蛋白表面的功能位点和活性中心。

• 溶菌酶的赖氨酸残基或N端伯胺亲核攻击 FITC 异硫氰酸碳原子。

• 形成稳定的氨基异硫氰酸酯键（thiourea）。

• 反应温和（通常在轻碱性缓冲液，pH 8–9，室温），避免蛋白质构象破坏，同时保持 FITC 的荧光性能。

2. 溶菌酶底物结合位点与反应活性
   溶菌酶活性中心主要位于其折叠的活性口袋，由谷氨酸、天冬氨酸等残基构成，负责催化多糖底物（如聚-N-乙酰葡萄糖胺）的糖苷键水解。FITC 偶联主要定位于表面赖氨酸残基，远离活性中心，因此对催化活性影响较小。适当控制偶联摩尔比和反应条件，可获得具有荧光信号且保留部分底物水解能力的 FITC-Lysozyme。

3. 荧光标记与反应性平衡

• 荧光强度与偶联密度：偶联密度过低，荧光信号不足；过高，可能引起蛋白质局部构象变化或活性位点阻碍。因此需通过调节 FITC/Lyz 摩尔比（常用 1:1 至 5:1）和反应时间（2–12 小时）平衡荧光性能与活性。

• 空间间隔：在部分体系中，可使用柔性短链（如 6-氨己酸 Ahx）连接 FITC 与蛋白，增强荧光团与蛋白活性中心的空间隔离，减少对底物结合的干扰。

4. 溶解性与反应条件优化
   FITC-Lysozyme 保持良好水溶性，可在中性或弱碱性缓冲液中稳定存在。偶联过程中，需避免高温、极端pH或高盐环境，以防蛋白折叠改变或聚集。通过适当缓冲体系（如碳酸盐缓冲液或磷酸盐缓冲液），反应活性可得到充分发挥，荧光标记与蛋白功能兼顾。

5. 生物实验与功能应用
   FITC-Lysozyme 的反应活性特性赋予其在实验和应用中的多种用途：

• 分子示踪：通过荧光信号追踪溶菌酶在细胞或组织中的摄取与分布。

• 底物水解实验：部分保留的催化活性可用于荧光底物反应实验，分析酶动力学。

• 复合体系构建：FITC-Lyz 可作为荧光标记模块，用于纳米载体、药物递送体系或蛋白-多糖复合物的构建，观察蛋白与靶分子相互作用。

• 细胞摄取与结合分析：荧光标记溶菌酶可用于研究胞内摄取路径、膜结合特性及局部环境对蛋白活性的影响。

6. 稳定性与储存
   FITC-Lysozyme 在缓冲液中保持荧光稳定性和蛋白构象完整性，避免长时间光照和极端温度。偶联稳定性良好，可在实验周期内保持反应活性，为荧光示踪和酶学实验提供可靠工具。

   关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09