FITC-lactalbumin，异硫氰酸荧光素标记乳清蛋白的分子结构与偶联特性

FITC-Lactalbumin 是通过异硫氰酸荧光素（Fluorescein Isothiocyanate, FITC）与乳清蛋白中的乳白蛋白（α-Lactalbumin, LAL）偶联形成的荧光标记蛋白衍生物。乳白蛋白为小分子量蛋白（约14.2 kDa），富含赖氨酸、谷氨酸及可反应的N端氨基，结构折叠紧密且水溶性良好。通过 FITC 偶联，乳白蛋白获得绿色荧光信号（激发约495 nm，发射约520 nm），用于分子示踪、细胞实验及蛋白相互作用研究，同时保留蛋白的溶解性和分子构象。

1. 分子结构与偶联特性
   FITC-Lactalbumin 的结构主要由以下几部分组成：

• 乳白蛋白骨架：由α-Lactalbumin蛋白链组成，保持其天然二级结构和四级折叠特性。蛋白表面暴露出多余氨基（赖氨酸侧链和N端伯胺），可作为化学偶联位点。

• FITC 荧光团：通过异硫氰酸基（–N=C=S）与蛋白氨基形成共价氨基异硫氰酸酯键（thiourea），赋予蛋白绿色荧光。荧光团与蛋白骨架的空间隔离设计保证了蛋白活性位点不受干扰。

• 偶联位点选择性：偶联主要发生在赖氨酸残基和N端氨基，避免对蛋白活性区域及二级结构产生影响。通过控制 FITC 与蛋白的摩尔比及缓冲条件，可实现荧光密度的可控分布。

2. 化学反应机理
   FITC 与乳白蛋白的反应属于典型的亲核加成反应：

   该反应机理保证 FITC-Lactalbumin 形成稳定共价偶联产物，可在水溶液或缓冲体系中保持荧光信号及结构完整性。

• 异硫氰酸基（–N=C=S）碳原子带有电子缺陷，易受亲核试剂攻击。

• 乳白蛋白表面的伯胺（–NH₂）攻击 FITC 的碳原子，形成稳定的氨基异硫氰酸酯键。

• 反应通常在轻碱性缓冲液（pH 8–9）中进行，室温反应数小时，使蛋白构象和折叠不受破坏，同时保证荧光团电子共轭体系完整。

3. 反应条件优化
   为最大化偶联效率且保留蛋白结构，反应条件需优化：

• 摩尔比：FITC 与蛋白的摩尔比通常控制在1:1至5:1范围，平衡荧光信号与蛋白构象。

• pH 调节：轻碱性环境有利于伯胺亲核攻击，同时降低蛋白聚集风险。

• 温度控制：室温操作避免蛋白热失活或折叠异常。

• 溶剂选择：缓冲液或含少量有机溶剂体系，兼顾溶解性与偶联反应速率。

4. 偶联化学特性

• 共价稳定性：氨基异硫氰酸酯键在中性或弱碱性环境下稳定，不易水解，保证荧光团与蛋白长时间共存。

• 空间隔离：荧光团与蛋白活性位点间保持一定空间距离，避免对蛋白功能或折叠产生阻碍。

• 水溶性保持：偶联过程中不破坏蛋白表面亲水性，保证溶解性和分散性，适合后续生物实验。

5. 化学研究与应用意义
   FITC-Lactalbumin 的化学反应原理为多种研究提供基础：

• 分子示踪：荧光团在蛋白表面均匀分布，可用于追踪乳白蛋白在细胞或组织中的摄取和分布。

• 蛋白-蛋白相互作用研究：偶联后的荧光信号可用于分析蛋白复合物形成及动力学。

• 载体或复合体系构建：荧光标记乳白蛋白可进一步与药物、纳米颗粒或聚合物结合，构建可视化功能化体系。

• 定量分析：通过荧光强度测定蛋白浓度及偶联效率，为实验设计提供可靠参考。

产品名称：FITC-lactalbumin

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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