FITC-ADP，荧光素标记二磷酸腺苷的研究应用

二磷酸腺苷（ADP）是细胞能量代谢及信号转导中的重要核苷酸分子，在ATP水解、磷酸转移、血小板活化、受体调控等过程中发挥关键作用。为了研究ADP的结合、代谢及信号通路行为，可将其与荧光素异硫氰酸酯（FITC, Fluorescein isothiocyanate）偶联形成FITC-ADP。该分子兼具ADP的生物功能与FITC的荧光特性，可用于受体结合、酶动力学分析、药物筛选以及细胞成像等实验。

一、FITC-ADP的化学反应原理

FITC含有异硫氰酸酯（–N=C=S）活性基团，可与含氨基的分子发生共价键合。ADP分子中虽然主要为核糖与磷酸结构，但在腺嘌呤环N6位可以通过化学修饰引入伯胺，从而实现与FITC的偶联。一般反应步骤如下：

1. ADP分子氨基化修饰（可选）
   为增强反应效率，可在ADP的核糖或腺嘌呤结构上引入氨基连接臂（linker），如通过碳二亚胺（EDC）或NHS酯活化磷酸位点后接入含胺的衍生物，使ADP具备可与FITC反应的自由氨基。

2. FITC活化与溶解
   FITC通常溶于DMSO或DMF，并在弱碱性条件下保持异硫氰酸酯活性。常用反应pH为8.0–9.0，保证异硫氰酸酯不被水解并促进与氨基的亲核攻击。

3. 共价偶联反应机制
   FITC的–N=C=S受到氨基的亲核攻击，形成稳定的硫脲键（–NH–C(=S)–NH–），实现FITC与ADP的共价连接。该反应无需高温，通常在室温下即可进行。

4. 纯化与结构确认
   偶联完成后，通过HPLC、透析或凝胶过滤去除游离FITC和未反应ADP，随后使用质谱（MS）、核磁（NMR）等方法确认FITC-ADP的结构与纯度。

二、FITC-ADP的分子特性

1. 结构特点
   FITC通过硫脲键连接在ADP上，保留二磷酸结构，有利于结合ADP依赖性酶或受体。由于FITC具有大共轭体系，其荧光信号在488 nm激发、520 nm发射波长范围内观测稳定。

2. 荧光可视化能力
   FITC的高量子产率和易检测性使FITC-ADP可用于细胞摄取、受体结合与竞争实验，以及受体-配体动力学分析。

3. 生物活性保留
   若连接位置设计合理，FITC-ADP仍可参与ADP相关过程，如酶催化反应、P2Y受体识别、血小板信号传导研究等。

三、FITC-ADP的研究应用

1. 受体结合与信号通路分析
   FITC-ADP可用于研究P2Y家族受体在细胞膜上的结合行为，通过荧光强度或FRET技术分析结合亲和力与动力学参数。

2. 酶活性与竞争实验
   可作为ADP模拟物，用于测定ADP依赖性激酶或转移酶活性，并与非标记ADP竞争，从而评估酶结合机制。

3. 细胞摄取与定位研究
   FITC-ADP可通过流式细胞术、共聚焦显微镜追踪其在细胞内的分布与转运途径，分析核苷酸转运蛋白与代谢路径。

4. 药物筛选平台
   FITC-ADP可用于高通量筛选，评价候选化合物对ADP受体或相关酶的抑制或激活作用。

产品名称：FITC-ADP

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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