CY7-PEG-NHS的合成及纯化过程，CY7-PEG-活性酯

CY7-PEG-NHS 是一种将近红外荧光染料 Cyanine7（CY7） 与聚乙二醇（PEG）链连接并末端修饰 NHS（N-hydroxysuccinimide）酯 的功能化分子。其分子结构主要包含三个模块：

CY7 荧光染料：吸收峰约 743–750 nm，发射峰约 767–780 nm，属于近红外 I/II 区域，具有强穿透性、低组织自发荧光背景和高光稳定性。NIR 波段可实现深组织成像和体内实时追踪。

PEG 链骨架：分子量通常为 2–5 kDa，为染料提供良好的水溶性、柔性空间和生物相容性，同时降低非特异性蛋白吸附及免疫清除，提高血液循环时间。

NHS 末端：为活性酯，可与伯胺（–NH₂）快速偶联，形成稳定酰胺键。该功能使 CY7-PEG-NHS 能与蛋白质、多肽、抗体或纳米载体实现定点修饰，为荧光示踪、成像及多功能载体构建提供化学基础。

2. 合成策略

2.1 起始原料

CY7-COOH（含羧基的 CY7 荧光染料）

NH₂-PEG-OH 或 HO-PEG-NH₂（末端羟基或氨基 PEG）

活化试剂：EDC·HCl 与 NHS

2.2 典型偶联步骤

CY7 活化

在无水 DMF 或 DMSO 中，CY7-COOH 与 NHS（1.2 eq）及 EDC·HCl（1.2 eq）反应 1–2 h，生成 CY7-NHS 活性酯

反应温度控制在室温或低温（20–25 ℃）以保证染料光稳定性

PEG 偶联

将 NH₂-PEG-OH 溶解于 DMF 中，加入 CY7-NHS 溶液

TEA 或 DIPEA 作为碱调节 pH ~7.5–8.5

室温搅拌 12–24 h

形成 CY7-PEG-NHS（末端保留活性酯，便于后续蛋白偶联）

2.3 纯化过程

透析法：使用适当 MWCO（1–3 kDa）透析膜去除未反应的 CY7 和小分子杂质

凝胶过滤（Sephadex G-25）：分离 PEG-染料偶联物与低分子杂质

超滤浓缩：进一步提高浓度并去除残余小分子

干燥：低温冻干得到粉末形式，便于长期储存

2.4 表征

UV-Vis 光谱：吸收峰 743–750 nm 确认染料存在

¹H NMR：PEG 链信号 (~3.5 ppm)，CY7 芳香环信号 (~6–8 ppm)

MALDI-TOF / ESI-MS：确认分子量与理论一致

HPLC：检测纯度及单分散性

产品名称：CY7-PEG-NHS

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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