FAM NHS，890090-41-2，水溶性蓝绿色荧光染料衍生物的合成路线

FAM NHS，即 5-（氨基）羧基荧光素（Fluorescein）活化为 N-hydroxysuccinimide 酯，是一种水溶性蓝绿色荧光染料衍生物，用于蛋白质、肽及其他生物分子标记。其化学结构包括：

荧光染料核心

FAM（5-(6)-carboxyfluorescein）为 xanthene 类荧光分子，具有高量子产率和良好光稳定性。

激发波长约 495 nm，发射波长约 520 nm，适合多重荧光实验与细胞成像。

NHS 酯官能团

通过羧基活化为 N-hydroxysuccinimide 酯，实现对蛋白质或多肽氨基的高效偶联。

NHS 酯反应温和、快速且高度选择性，生成稳定酰胺键。

水溶性与可操作性

FAM 具有一定亲水性，NHS 酯可在干燥条件下储存稳定。

可与氨基化载体或蛋白质在温和条件下进行共价偶联。

2. 合成路线

FAM NHS 的合成通常分为 羧基活化 与 NHS 酯化 两步完成：

2.1 原料选择

起始物：5-羧基荧光素（5-carboxyfluorescein）

活化试剂：N-hydroxysuccinimide（NHS）

偶联剂：EDC·HCl（1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride）或 DCC（Dicyclohexylcarbodiimide）

溶剂：干燥 DMF（N,N-dimethylformamide）或 DCM（Dichloromethane）

2.2 步骤概述

步骤 1：羧基活化

5-羧基荧光素溶于干燥 DMF 中。

添加 NHS 与 EDC·HCl，EDC 活化羧基生成 O-acylisourea 中间体。

中间体与 NHS 反应，形成稳定的 NHS 酯，并释放尿素副产物。

反应温度通常为室温，搅拌 2–6 小时以保证完全转化。

步骤 2：纯化与表征

通过硅胶柱层析去除未反应的原料、EDC 副产物和多余 NHS。

使用适宜溶剂（如 DCM/乙酸乙酯混合体系）洗脱目标产物。

纯度和结构确认：

¹H NMR：荧光素和 NHS 酯特征峰

ESI-MS 或 MALDI-TOF MS：分子量确认

UV-Vis 光谱：荧光染料特征吸收峰（约 495 nm）

2.3 反应特点与优化

反应温和，避免荧光素光降解或水解。

干燥环境可减少 NHS 酯水解，提高收率。

摩尔比控制（FAM:NHS:EDC ≈ 1:1.2:1.2）可优化产物纯度与收率。

产品名称：FAM NHS

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

UV-Tracer-炔-琥珀酰亚胺酯（1628029-06-0）

Sulfo-Cy5 SE(triSO3)

881178-43-4

Sulfo-Cy5 tetrazine

Cyanine7-Hydrazide

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09