Fluo-4 AM是一种高灵敏度钙离子荧光探针，用于检测细胞内游离钙离子（Ca²⁺）浓度变化。它属于基于荧光素（Fluorescein）骨架改良的Ca²⁺指示剂，具有高信噪比、优良的细胞渗透性和较低的光漂白率，是现代细胞钙信号研究中常用的探针之一。

Fluo-4的基本原理与经典的Fluo-3相似，均基于螯合钙离子后引起荧光强度增强的机制。游离态的Fluo-4荧光较弱，当与Ca²⁺结合后，其荧光量子产率显著提升（约100倍），激发波长为494 nm，发射波长为516 nm，呈明亮的绿色荧光。与Fluo-3相比，Fluo-4的亮度更高、荧光信号更稳定，适合共聚焦或流式细胞术检测。

Fluo-4 AM是其细胞渗透性酯化形式，其中“AM”代表乙酰氧甲基酯（acetoxymethyl ester）。该疏水保护基使探针能够轻易穿透细胞膜，进入细胞后被胞内酯酶水解，释放出带有负电荷的游离Fluo-4，从而被固定在细胞内，实现对细胞内Ca²⁺浓度变化的实时监测。

Fluo-4 AM的工作机制如下：

细胞加载：探针溶于DMSO和Pluronic F-127后加入细胞培养液，短时间孵育即可被细胞吸收；

脱酯激活：进入细胞后，胞内酯酶切除AM基团，形成活性Fluo-4分子；

Ca²⁺结合：当细胞发生刺激、信号转导或电生理变化导致Ca²⁺内流时，Fluo-4与Ca²⁺结合形成高荧光复合物；

荧光检测：通过激光共聚焦显微镜或流式细胞仪，在绿色通道（约516 nm）下监测荧光强度变化，反映细胞内钙信号动态。

Fluo-4 AM广泛应用于以下研究方向：

神经科学：检测神经元放电、突触活动或受体激活引起的Ca²⁺波动；

心肌与平滑肌研究：记录肌细胞兴奋-收缩偶联过程中的钙信号变化；

药理学筛选：用于评价药物对离子通道、受体或信号通路的影响；

高通量成像与流式分析：Fluo-4与Ca²⁺结合后的荧光信号强度高，适合自动化成像系统。

名称：Fluo-4 AM

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

供应：西安齐岳生物科技有限公司

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