四甲基罗丹明-5-异硫氰酸(5-TRITC)是一种经典的罗丹明(Rhodamine)类荧光染料,广泛应用于生物分子标记、细胞成像与免疫荧光研究中。其化学结构包含一个强吸光的咔唑型共轭体系,使其在绿色光激发(约555 nm)下发射明亮的橙红色荧光(发射峰约为580–590 nm)。TRITC的关键反应位点为异硫氰酸基团(–N=C=S),该基团可与生物分子中的伯胺(–NH₂)基团发生稳定的硫脲键(–NH–CS–NH–)共价偶联,从而实现与蛋白质、抗体、多肽或氨基修饰寡核苷酸的高效连接。
与FITC(荧光素异硫氰酸酯)相比,TRITC具有更高的光稳定性和更长的发射波长,可在多色荧光系统中与绿色、蓝色荧光染料(如FITC、DAPI)实现光谱分离,避免信号重叠。由于其发射信号强、光漂白慢、量子产率高,5-TRITC被广泛用于制备抗体标记物、荧光蛋白探针、细胞膜染料及核酸标记物,尤其适合在共聚焦显微镜、荧光显微镜及流式细胞术中进行高灵敏成像。
5-TRITC的分子设计中,四个甲基取代基增强了分子的疏水性并降低了分子内能量耗散,使荧光信号更加稳定。在生化实验中,5-TRITC常溶于DMSO或DMF中使用,随后在碱性条件下与靶分子反应。其标记效率高、反应条件温和,可在室温下进行而不破坏生物分子的活性。此外,TRITC标记的分子具有较高的光稳定性,适用于长期的荧光追踪和时间分辨成像。
在实际应用中,5-TRITC可用于标记免疫球蛋白、细胞骨架蛋白(如肌动蛋白)、微管、脂质体、纳米颗粒等,用于细胞定位和分子交互研究。由于其疏水性较强,也可作为细胞膜染料使用,用于监测膜电位变化或内吞过程。近年来,TRITC衍生物还被用于构建荧光比率探针和能量转移系统(如FRET),与荧光素(FITC)或Cy3等染料配对,用于检测蛋白质构象变化、分子相互作用等动态过程。
名称:四甲基罗丹明-5-异硫氰酸
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安齐岳生物科技有限公司
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