TRITC-Heparin的合成及纯化过程,四甲基罗丹明异硫氰酸酯染料标记肝素
TRITC-Heparin 是一种结合了TRITC(四甲基罗丹明异硫氰酸酯)染料与肝素(Heparin)的荧光标记分子。TRITC作为荧光染料,具有较强的荧光发射特性,而肝素作为一种重要的生物分子,用于细胞生物学、分子生物学和药物递送等领域。将TRITC与肝素结合,能够实现对肝素分子的追踪,便于观察其在细胞和组织中的分布。
1. 合成步骤
步骤 1:TRITC的活化
首先,需要对TRITC染料进行活化,通常使用异硫氰酸酯(NHS)衍生物来进行活化。通过将TRITC与NHS进行反应,可以获得具有活性基团的TRITC。此步骤通常在无水溶剂(如DMSO)中进行,以避免水分对反应的干扰。
步骤 2:肝素的准备
准备合适浓度的肝素溶液,肝素作为多糖,具有多个带负电荷的羧基,容易与带有正电荷的氨基化学物质发生偶联反应。在此步骤中,使用适量的肝素溶液,将其调节至适合反应的pH范围(通常为中性至弱碱性环境)。
步骤 3:偶联反应
将活化的TRITC与肝素溶液混合。在适当的温度(通常为室温或稍低的温度)下,允许反应发生。此时,TRITC染料的异硫氰酸酯基团与肝素中的氨基、羟基或硫酸基团反应,形成稳定的共价键,成功地将TRITC染料标记到肝素分子上。
步骤 4:反应优化与控制
反应时间需要根据实验要求进行优化,通常反应时间为1-4小时。反应过程中需要不断搅拌,确保TRITC均匀地与肝素反应。在此过程中,可以通过测量荧光强度,确保标记效果达到预期。
2. 纯化过程
步骤 1:去除未反应的TRITC
为了去除未反应的TRITC染料,采用透析法或凝胶过滤法(如Sephadex柱层析)。透析可以有效地去除反应体系中的自由TRITC染料及小分子杂质,从而获得纯净的TRITC-Heparin。
步骤 2:浓缩与表征
通过透析后,可以使用超滤或旋转蒸发浓缩标记的TRITC-Heparin溶液。此后,通过荧光光谱法(如激发和发射光谱)检测标记的效果,确保TRITC标记的肝素具有良好的荧光特性。
步骤 3:质量控制与纯度检测
后,通过高效液相色谱(HPLC)或凝胶电泳对合成的TRITC-Heparin进行质量控制,确认其纯度和标记效率,确保没有非特异性结合或其他杂质。
产品名称:TRITC-Heparin
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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