AF350-活性酯,AlexaFluor350-NHS,反应活性机制
AF350-活性酯,AlexaFluor350-NHS骨架与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯结合而成。Alexa Fluor 350是一种蓝光荧光染料,具有吸收峰约为346 nm、发射峰约为443 nm的光学特性,提供高量子产率、低背景的荧光信号,适合在多色荧光实验中与其他波段染料组合使用。通过引入NHS活性酯官能团,AF350-NHS能够高效、选择性地与含初级氨基的生物分子发生共价偶联,从而构建功能化的荧光标记体系,用于蛋白质、肽链、核酸及纳米载体等化学和生物学研究。
反应活性机制方面,AF350-NHS的核心在于NHS活性酯的高亲电子性和选择性。NHS活性酯通过羧基活化形成,具有良好的亲电子性,可被蛋白质或其他生物分子中的初级氨基作为亲核试剂攻击,生成稳定的酰胺键。该反应通常在弱碱性缓冲体系(pH 7.2~8.5)中进行,无需额外催化剂,条件温和,不破坏生物分子的结构和功能。NHS活性酯的高反应速率和高选择性使AF350-NHS能够在复杂体系中实现快速偶联,提高荧光标记效率。
在偶联反应中,AF350-NHS首先通过活化羧基形成NHS酯中间体,该中间体具有增强的电子亲和性和反应活性,能够被氨基迅速攻击生成酰胺键,同时副反应(如水解)速率较低。在实际应用中,可通过控制pH值、反应时间及染料与目标分子的摩尔比,优化偶联效率和标记密度。通常,反应在室温下进行15分钟至数小时即可完成,随后可通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的染料和副产物,获得高纯度的AF350标记分子。
AF350-NHS的反应活性不仅体现在化学偶联效率上,还在于其在水性体系中的稳定性和可控性。NHS活性酯在干燥或有机溶剂条件下保存较为稳定,可在使用前溶解于PBS、碳酸盐缓冲或适当混合溶剂中,保持高活性。通过合理设计缓冲体系和反应条件,可以降低非特异性标记和水解的影响,从而保证标记体系的可靠性和可重复性。
应用示例方面,AF350-NHS常用于蛋白质标记和多色荧光实验。例如,可将其偶联至抗体、酶或多肽分子,实现靶向标记和追踪;在核酸标记中,也可通过含氨基修饰的寡核苷酸实现高效荧光标记。其蓝光荧光特性与绿色、红色或近红外染料组合时,能够实现多通道成像和复合分析。在纳米材料功能化中,AF350-NHS可与含氨基的纳米颗粒或载体偶联,实现荧光追踪、动力学分析及生物成像实验。
总体而言,AF350-活性酯(Alexa Fluor 350-NHS) 是一种结合NHS化学活性和水溶性荧光特性的高性能染料分子。其反应活性高、条件温和、选择性强,能够高效偶联蛋白质、肽链、核酸及纳米载体,实现稳定荧光标记和可控功能化。AF350-NHS在化学研究、生物标记、多色荧光成像及纳米材料功
产品名称:AlexaFluor350-NHS
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09




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