FITC-雷帕霉素,FITC-Rapamycin,异硫氰酸标记雷帕霉素的纯化过程
FITC-雷帕霉素(FITC-Rapamycin)是一种通过将大环内酯类药物雷帕霉素与异硫氰酸荧光素(FITC)共价偶联形成的功能化分子,用于化学研究、分子追踪及药物相互作用分析。雷帕霉素分子具有多个羟基、醚键及大环内酯环,提供了丰富的亲核反应位点,而FITC的异硫氰酸基(–N=C=S)能够与雷帕霉素分子中的氨基或羟基形成稳定的硫脲键或酯化衍生物,从而实现荧光标记而保持药物核心结构的完整性。FITC-雷帕霉素可在极性有机溶剂如DMSO或DMF中溶解,也可在缓冲液中形成均一溶液,适用于体外化学实验和细胞分析,其荧光性能强,激发波长约为490纳米,发射波长约为520纳米,光稳定性较好,能够提供高灵敏度的检测信号。
在纯化过程中,FITC-雷帕霉素首先需通过控制偶联反应条件提高反应效率。一般在弱碱性缓冲体系中进行,加入三乙胺(TEA)等助碱剂以去质子化雷帕霉素的氨基或羟基,提高亲核性,反应温度控制在室温至轻微升温范围(25–37℃),避免FITC光降解及雷帕霉素结构破坏。偶联完成后,反应混合物通常含有未反应的FITC、雷帕霉素以及副产物,需要进行纯化以获得高纯度标记产物。常用纯化方法包括硅胶柱层析和反相高效液相色谱(HPLC),梯度洗脱体系如乙腈-水或甲醇-水可有效分离未反应物和偶联产物。在层析过程中,通过检测荧光信号可快速识别FITC标记的雷帕霉素产物,同时监控纯化进程,保证产物的纯度与收率。纯化后的产物通常进行冻干处理,避光和低温保存,以保持化学稳定性和荧光性能。
在表征方面,FITC-雷帕霉素的结构和纯度可通过多种手段进行确认。核磁共振(NMR)可用于确认雷帕霉素大环内酯骨架及偶联位置,分析偶联是否影响药物核心结构;质谱(MS)可精确测定偶联产物的分子量,验证FITC标记是否成功;高效液相色谱(HPLC)则可用于定量分析纯度及检测残留未反应物;荧光光谱和紫外-可见光谱可用于评价荧光性能,确认荧光强度和发射特性是否符合实验需求。通过多重表征手段,可确保FITC-雷帕霉素在化学反应和生物实验中的稳定性和可靠性。
总的来说,FITC-雷帕霉素是一种通过异硫氰酸基与雷帕霉素分子中的氨基或羟基反应形成的荧光标记分子,其纯化过程依赖于硅胶柱层析或反相HPLC分离未反应物和副产物,表征结合NMR、质谱、HPLC及荧光光谱综合分析产物结构和性能。该分子在化学研究和分子追踪实验中既保留了雷帕霉素的核心结构,又提供了可视化荧光信号,为分子相互作用分析、药物动力学研究及化学修饰实验提供可靠的工具,同时兼具结构稳定性、操作便捷性和实验可重复性。
产品名称:FITC-雷帕霉素
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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