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AF594叠氮,AF594 Ethyl NHS Ester的水溶性修饰介绍
发布时间:2025-11-11     作者:axc   分享到:

AF594叠氮,AF594 Ethyl NHS Ester的水溶性修饰介绍

AF594 Ethyl NHS Ester(通常称为AF594叠氮或AF594活性酯)是一种功能性荧光标记试剂,由Alexa Fluor 594荧光核心和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯结合而成。Alexa Fluor 594是一种中红光区荧光染料,激发峰约为590纳米,发射峰约为617纳米,具有高亮度、良好的量子产率和光稳定性。NHS酯末端为该分子提供了高选择性的化学反应活性,可与伯胺(–NH₂)官能团形成稳定的酰胺键,实现蛋白质、多肽或其他含氨基生物分子的特异性标记。

AF594 Ethyl NHS Ester的设计兼顾了荧光性能与化学反应性。荧光核心提供稳定、明亮的红色发光信号,使其在多通道荧光成像、流式细胞分析和共聚焦显微镜实验中表现出低自体荧光干扰和高信噪比。末端的NHS酯为温和条件下的生物标记提供化学基础,保证标记反应的特异性和效率。同时,分子中常含有亲水性取代基,如羧酸或磺酸基,以提高水溶性和降低非特异性吸附,适用于生物体系。

合成路线

AF594 Ethyl NHS Ester的合成通常包括三个关键步骤:荧光核心制备、水溶性修饰以及NHS酯化活化。

  1. 荧光核心制备
    首先合成Alexa Fluor 594的荧光核心。该核心通常为共轭多环芳香体系,包含苯环、吲哚或类似结构,通过共轭结构实现特定激发和发射波长。荧光核心的合成一般采用芳香环的缩合、醛化、吡咯或胺基取代等有机合成方法,形成高度共轭体系。在此过程中,为保证水溶性和后续官能化反应,荧光核心上可能引入羧酸、磺酸或羟基取代基。

  2. 水溶性修饰
    荧光核心合成完成后,为提高在水相体系中的溶解性和生物相容性,需要进行水溶性修饰。通常通过引入羧酸或磺酸基团,使染料具有良好的亲水性,减少非特异性吸附,并保持荧光性质的稳定性。此步骤不仅改善溶解性,也为后续NHS酯化提供化学位点。

  3. NHS酯化活化
    荧光核心的羧酸官能团通过N-羟基琥珀酰亚胺活化形成NHS酯。一般采用羧酸与NHS在碳二亚胺(如DCC或EDC)催化下进行活化,生成末端活性酯。活化过程中,羧酸碳原子形成中间酰基中间体,与NHS反应生成NHS酯,同时生成DCC副产物或水溶性EDC副产物。反应条件温和,一般在有机溶剂中进行,并在低温避光条件下操作,以防止荧光团降解或光漂白。

合成完成后,反应混合物通常含有未反应的原料、活性酯及副产物,需要通过高效液相色谱(HPLC)、透析或凝胶过滤进行纯化。纯化步骤可去除未反应的染料和副产物,获得高纯度、光学性能稳定的AF594 Ethyl NHS Ester。纯化产物通常在低温、避光条件下储存,以保证其长期化学稳定性和荧光活性。

产品名称:AF594 Ethyl NHS Ester

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

AF594 Ethyl NHS Ester

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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