iFluor 750 酪胺(又称 iFluor 750 Tyramide 或 Alexa Fluor 750酪胺)是一种基于近红外荧光染料的信号放大型标记试剂,结合了iFluor或Alexa Fluor系列染料的高亮度特性与酪胺(tyramide)信号放大反应(TSA, Tyramide Signal Amplification)机制。该试剂发射波长约在 780 nm 左右,位于近红外光区,具有高亮度、低背景和优异的组织穿透能力,常用于免疫荧光、原位杂交(ISH/FISH)、免疫组化(IHC)及高灵敏成像等实验。
其分子由三部分组成:
iFluor 750 或 Alexa Fluor 750 染料基团——一种高量子产率、光稳定性强的近红外荧光团;
酪胺(tyramide)官能团——作为信号放大载体,可通过酶催化形成共价键;
连接链——保证染料的水溶性与空间柔性。
其核心反应原理基于辣根过氧化物酶(HRP)催化体系。当HRP与过氧化氢(H₂O₂)共存时,可催化酪胺氧化生成活性自由基,该自由基可与样品中酪氨酸残基或邻苯二酚基团共价结合,从而在信号位置沉积荧光染料分子,实现局部荧光信号的显著增强。与传统直接标记方法相比,酪胺信号放大技术的敏感度提升可达几十倍甚至上百倍。
iFluor 750 酪胺在生物成像中具有显著优势:
发射波长长:750–780 nm 的发射可显著降低组织自发荧光干扰,适合深层组织或复杂样品检测;
高光稳定性:适合长时间显微成像与共聚焦扫描;
良好水溶性与低非特异结合:分子中含有磺酸基团,可减少在细胞膜及蛋白质上的非特异吸附;
与多色检测兼容:可与绿色、橙色、红色荧光探针(如FITC、TRITC、Cy5等)配合使用,实现多通道检测。
在实验应用中,iFluor 750 Tyramide 常用于配合HRP标记的二抗或探针进行信号放大。例如,在免疫荧光或原位杂交实验中,先利用HRP偶联的抗体或探针识别靶标,随后加入含iFluor 750酪胺与少量H₂O₂的工作液,酶催化下酪胺自由基即在靶标周围形成稳定共价沉积,从而放大信号并获得高对比度荧光图像。该方法不仅增强信号强度,还具有高空间精度,适合检测低丰度靶标。

名称:iFluor 750 酪胺
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安齐岳生物科技有限公司
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