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892156-52-4,化学试剂AT 425 Maleimide的合成路径与反应机制
发布时间:2025-11-17     作者:wyh   分享到:

产品名称:892156-52-4,化学试剂AT 425 Maleimide的合成路径与反应机制

化学本质与核心结构

分子组成:分子式为C₂₈H₃₃N₃O₇,分子量523.58,属于磺化苯乙烯基类染料衍生物。其核心结构由ATTO 425荧光团与马来酰亚胺基团偶联而成,兼具高荧光性能与生物正交反应活性。

荧光特性:激发波长438-439 nm,发射波长484-489 nm(蓝光波段),量子产率≥0.9,光稳定性良好,Stokes位移大,背景噪声低,适用于长时间动态追踪(如活细胞成像)及高分辨率显微技术(如STED、PALM)。

反应基团:马来酰亚胺(-C(=O)-CH=CH-C(=O)-NH-)可特异性与生物分子(如蛋白质半胱氨酸残基、硫醇化核酸)的巯基(-SH)发生迈克尔加成反应,形成稳定硫醚键,避免非特异性标记。

合成路径与反应机制

合成逻辑:基于ATTO 425荧光团的化学修饰,通过酯化或偶联反应引入马来酰亚胺基团。典型步骤包括:

荧光团制备:以ATTO 425母核为基础,通过磺化、氨基化等反应构建荧光骨架。

马来酰亚胺偶联:在碱性条件(pH 7-7.5)下,将马来酰亚胺与荧光团的羧酸基团通过EDC/NHS催化形成活性酯,或直接通过硫醇-烯点击反应引入。

纯化与表征:采用硅胶柱层析、HPLC或透析纯化,通过NMR、质谱及紫外-可见光谱验证结构完整性。

反应机制:在无水、避光条件下,马来酰亚胺与巯基在pH 7.0-7.5下快速反应,形成稳定硫醚键,避免水解副反应。反应需使用无羟基溶剂(如DMF、DMSO),并添加抗氧化剂(如BHT)防止染料氧化。

关键功能特性

生物标记能力:

蛋白质/抗体标记:用于荧光免疫染色、Western blot、流式细胞术,提升检测灵敏度与信噪比。

核酸标记:修饰硫醇化DNA/RNA探针,适用于FISH、单分子检测及基因编辑追踪。

活细胞成像:低毒性、高光稳定性支持长时间动态观察细胞过程(如膜蛋白追踪、信号通路分析)。

超分辨显微技术:与STED、PALM等技术兼容,实现单分子级别定位,适用于纳米级生物结构解析。

多模态应用:结合生物素-链霉亲和素系统,用于ELISA、免疫组化及高亲和力检测体系;构建FRET探针检测金属离子(如Ca²⁺)、酶活性或病原体识别。

892156-52-4,化学试剂AT 425 Maleimide

关于我们:

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