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Sybr Green I的功能机制与优势
发布时间:2025-11-17     作者:wyh   分享到:

产品名称:Sybr Green I的功能机制与优势

功能机制与优势

实时定量PCR(qPCR)

原理:通过荧光信号实时监测PCR扩增过程,无需设计探针,适用于任何DNA模板。

优势:成本低、操作简便;灵敏度高(检测限达20pg DNA,优于EB 25-100倍);与现有仪器(如LightCycler)滤光片匹配,兼容熔解曲线分析(区分特异性扩增与非特异性产物)。

注意事项:需优化Mg²⁺浓度以避免高浓度抑制聚合酶活性;熔解曲线可验证产物特异性。

核酸电泳与染色

应用:琼脂糖/聚丙烯酰胺凝胶、毛细管电泳的dsDNA染色,无需脱色或冲洗,背景荧光低,信噪比高。

优势:对Taq酶、逆转录酶等无抑制,安全性远高于EB(诱变性低);支持电泳后染色,兼容Southern blot。

其他应用场景

流式细胞术:细胞DNA定量分析。

基因芯片与等温扩增:如重组酶聚合酶扩增(RPA)结合SYBR Green I的BVDV快速检测(37℃/25分钟,灵敏度达1×10³ copies/μL)。

分子诊断:用于病原体检测、基因表达分析、SNP分型等。

优缺点深度分析

优点:

通用性强:无需探针设计,适配任何DNA模板。

经济高效:成本低于探针法,适合高通量筛查。

安全性高:诱变性远低于EB,生物相容性好。

灵敏度与稳定性:检测限低,30次循环活性损失仅6%,适用于长时间实验。

缺点:

非特异性结合:可能结合引物二聚体或非特异性产物,导致假阳性,需熔解曲线验证。

引物设计要求高:需避免二级结构干扰,优化引物特异性。

浓度依赖性:高浓度可能抑制聚合酶活性,需优化反应体系。

与EB染料的对比

安全性:SYBR Green I无致癌性,EB具有强诱变性和致癌性。

灵敏度:SYBR Green I检测限更低(20pg vs EB的500pg),且不抑制酶活性。

操作便捷性:SYBR Green I无需脱色,兼容多种电泳条件,而EB需额外脱色步骤。

Sybr Green I

关于我们:

西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


我们能提供的产品:

MAL-PEG-DOTA 马来酰亚胺-聚乙二醇-四氮杂环十二烷四乙酸

NHS-PEG-DOTA 活性酯-聚乙二醇-四氮杂环十二烷四乙酸

N3-PEG-DOTA 叠氮-聚乙二醇-四氮杂环十二烷四乙酸

Alkyne-PEG-DOTA 炔基-聚乙二醇-四氮杂环十二烷四乙酸

SH-PEG-DOTA 巯基-聚乙二醇-四氮杂环十二烷四乙酸

Biotin-PEG-DOTA 生物素-聚乙二醇-四氮杂环十二烷四乙酸

CHO-PEG-DOTA 醛基-聚乙二醇-四氮杂环十二烷四乙酸

OPSS-PEG-DOTA 邻吡啶二硫-聚乙二醇-四氮杂环十二烷四乙酸

OH-PEG-DOTA 羟基-聚乙二醇-四氮杂环十二烷四乙酸


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