FITC-10-Hydroxydecanoic acid,FITC-10-羟基癸酸的纯化与表征
FITC-10-羟基癸酸是一种荧光衍生物,由荧光染料异硫氰酸荧光素(FITC)与 10-羟基癸酸偶联形成。FITC 是一种广泛使用的绿色荧光染料,激发波长约为 495 nm,发射波长约为 520 nm。通过与 10-羟基癸酸的偶联,FITC-10-羟基癸酸将荧光特性引入含羟基的脂肪酸分子,实现荧光标记,同时保留羟基和羧基等功能基团的化学活性。该化合物常用于脂质分子标记、脂肪酸代谢研究及分子成像实验。
结构上,FITC-10-羟基癸酸包含三个部分:FITC 的异硫氰酸基团、连接的羟基癸酸链,以及羧基末端。异硫氰酸基团能够与羟基或氨基反应形成稳定的共价键,使 FITC 与 10-羟基癸酸偶联,从而生成稳定的荧光分子。羟基癸酸链提供一定的疏水性,使分子在脂质环境中可定位,同时羟基提供进一步化学修饰的可能性。
纯化方法
FITC-10-羟基癸酸的合成通常通过异硫氰酸基团与羟基反应进行。在反应完成后,产物混合物中可能含有未反应的 FITC、未偶联的羟基癸酸及副产物,因此需要纯化以获得纯净的标记产物。常用的纯化方法包括:
柱层析
使用硅胶或反相硅胶(C18)作为固定相。
通过极性梯度洗脱,可以有效分离 FITC-10-羟基癸酸与未反应物。
由于 FITC-衍生物在紫外或可见光下具有吸收,可通过紫外检测快速定位产物。
高效液相色谱(HPLC)
反相 HPLC 常用于进一步纯化,确保产物纯度高于 95%。
洗脱液通常为水-乙腈梯度体系,可加入少量酸(如乙酸)以改善分离效果。
HPLC 检测可使用 495 nm 激发波长监测 FITC 的吸收峰,确保目标产物纯度。
沉淀与重结晶
在某些情况下,可利用溶解性差异,通过溶剂沉淀或重结晶去除未反应物。
例如在极性溶剂中溶解产物后,加入非极性溶剂沉淀 FITC-10-羟基癸酸,进一步去除游离 FITC。
表征方法
纯化后的 FITC-10-羟基癸酸通常通过多种分析方法进行表征,以确认结构和纯度:
核磁共振(NMR)
^1H NMR 可用于确认羟基癸酸链及 FITC 芳香环的化学位移。
^13C NMR 可进一步确认羧基、羟基及芳香碳的化学环境。
NMR 光谱可以判断偶联是否完全,并排除未反应的羟基或 FITC。
质谱(MS)
通过质谱可获得分子量信息,验证 FITC-10-羟基癸酸的分子质量是否与理论值一致。
常用方法包括 ESI-MS 或 MALDI-TOF,可检测分子离子峰及主要碎片离子。
紫外-可见光光谱(UV-Vis)
FITC 含有特征吸收峰,在 495 nm 附近有强吸收。
UV-Vis 光谱可以快速确认荧光基团的存在及浓度。
荧光光谱
激发波长 495 nm,测定发射波长约为 520 nm。
荧光强度可用于评估标记效率及纯化效果。
薄层色谱(TLC)
简单快速检查产物的存在和反应是否完全。
可用紫外灯观察 FITC 荧光点,区分未反应物和产物。
产品名称:FITC-10-羟基癸酸
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09




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