7-氨基放线菌素D,7-Aminoactinomycin D,反应原理
7-氨基放线菌素D(7-AAD)是一种含有芳香氨基和环状肽链的有机染料衍生物,属于放线菌素类化合物。它是通过对天然放线菌素D分子在7位引入氨基形成的衍生物。7-AAD具有特定的荧光特性,其吸收峰约为546 nm,发射峰约为647 nm,可在红色光通道进行检测。该分子能够与双链DNA结合,特别是在膜完整性受损的细胞中更易进入细胞核,与DNA的碱基通过非共价作用力结合,形成稳定复合物,从而实现细胞核或染色体的可视化。7-AAD因其选择性和荧光性质广泛应用于细胞活性检测、凋亡研究及流式细胞术中。
2. 化学结构特点
7-AAD的化学结构包括芳香核苷样多环系统、氨基功能团以及放线菌素肽链骨架:
芳香多环体系:形成稳定的共轭结构,赋予分子特定吸收和发射光谱,保证荧光信号强度和可检测性。
7位氨基官能团:提供反应活性位点,使分子具有亲核性或可与其他化学基团形成非共价相互作用。
环肽链:维持分子空间构型和DNA结合能力,通过静电、氢键和疏水作用增强与核酸的结合稳定性。
这些结构特点使7-AAD能够选择性进入膜受损的细胞,并与DNA形成稳定复合物,发出红色荧光信号。
3. 反应原理
7-AAD与DNA结合的反应原理主要依赖于分子间非共价相互作用,包括以下几个方面:
(1)插入作用(Intercalation)
7-AAD分子的芳香多环体系能够插入DNA双链碱基对之间。通过平行堆叠和π-π相互作用,芳香环稳定地位于碱基对之间,限制DNA局部结构的自由旋转,从而实现高亲和力结合。插入作用是7-AAD荧光增强和特异性识别DNA的核心机制。
(2)静电作用
DNA骨架带有磷酸负电荷,而7-AAD分子上的氨基和部分质子化位点可与DNA磷酸骨架产生静电吸引力。这种静电相互作用增强了分子与DNA的结合稳定性,尤其在低盐或中等离子强度条件下效果明显。
(3)氢键与分子识别
7位氨基及环肽链上的羟基或酰胺基团能够与DNA碱基的氢键供体或受体形成氢键网络,使分子在碱基对间定位稳定。氢键作用不仅增强结合力,还提供一定的序列选择性,确保染料在细胞核中的均匀结合。
(4)荧光增强机制
自由状态下的7-AAD荧光较弱,但与DNA结合后,由于分子受限、插入作用稳定及溶剂屏蔽效应,荧光量子产率明显提高,从而在红色光通道产生强烈荧光信号。这一机制使7-AAD能够用于活细胞或膜受损细胞的区分检测。
产品名称:7-氨基放线菌素D(7-AAD)
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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