Cyanine 5 Tyramide Conjugates,Cy5荧光染料修饰酚胺的化学特性
Cyanine 5 Tyramide Conjugates 是以 Cyanine 5(Cy5)荧光染料 为核心,结合 酚胺(Tyramide) 功能化的荧光标记衍生物。Cy5 荧光团激发波长约为649 nm,发射波长约为670 nm,具有高亮度、光稳定性强和窄发射光谱的特点。Tyramide 作为酚胺衍生物,能够在过氧化物酶(如 HRP)催化下通过自由基反应共价结合到蛋白质、抗体或组织结构上,实现信号放大标记(Tyramide Signal Amplification, TSA)。Cyanine 5 Tyramide Conjugates 兼具荧光成像和酶催化特异性,广泛应用于免疫组织化学、免疫荧光和单细胞成像等实验。
一、化学特性
荧光核心结构
Cyanine 5 荧光团由二吲哚或苯并吲哚衍生的共轭碳链构成,形成连续 π 共轭体系,保证高量子产率和光稳定性。其窄发射峰使多通道成像实验中干扰最小,适用于复杂生物体系的荧光分析。Tyramide 功能化
Tyramide 含有酚羟基和胺官能团,可在过氧化物酶存在下被氧化形成酚自由基,攻击酪氨酸残基或其他蛋白质侧链,实现不可逆共价结合。通过 Cy5 与 Tyramide 共价连接形成 Conjugate,既保留荧光信号,又具备酶催化下的靶向结合能力。结构特点
Cyanine 5 Tyramide Conjugates 的结构通常由荧光团、链段连接器和 Tyramide 末端组成。连接器提供一定空间灵活性,保证酶催化活性和荧光团信号不受干扰,同时避免对蛋白质或组织结构造成空间阻碍。
二、结构合成概述
Cyanine 5 Tyramide Conjugates 的合成主要涉及 荧光团功能化、Tyramide 修饰和偶联反应,具体步骤如下:
Cy5 荧光团活化
Cy5 先进行化学活化,例如通过 NHS 酯或异硫氰酸酯形式生成可反应的活性中间体,为后续与 Tyramide 偶联提供反应位点。活化通常在干燥有机溶剂(如 DMSO 或 DMF)中进行,以防止水解和副反应。Tyramide 衍生物制备
Tyramide 分子端含酚羟基和胺基,可通过保护基策略(如 Boc 或 Fmoc)保护胺基,避免非特异性偶联。保护后的 Tyramide 可与活化的 Cy5 中间体反应,形成稳定的共价连接。偶联反应
Cy5 NHS 酯与保护的 Tyramide 胺基在室温下发生酰胺化反应,形成 Cy5-Tyramide 共价结合产物。连接器长度和化学性质设计合理,保证荧光团和酶底物功能不受干扰。去保护及纯化
偶联完成后,通过酸性或碱性条件去除保护基,暴露 Tyramide 的活性酚羟基和胺基。产物通过高效液相色谱(HPLC)或凝胶过滤纯化,以去除未反应染料、残留保护基及副产物,获得高纯度的 Cyanine 5 Tyramide Conjugates。表征
纯化后的产物通过质谱(MS)、核磁共振(NMR)以及荧光光谱验证其结构完整性、分子量和光学特性,确保酶催化下可发挥信号放大功能,同时荧光团保持高亮度。
三、应用优势
信号放大:在 TSA 实验中,Cy5-Tyramide 可在 HRP 存在下生成酚自由基,实现靶向蛋白质标记和信号放大。
多通道兼容:红色荧光可与 DAPI、FITC 等其他荧光染料组合,进行多通道成像。
空间灵活性:连接器设计保证酶催化和荧光信号互不干扰,适用于蛋白质、抗体和组织标记。
产品名称:Cyanine 5 Tyramide Conjugates
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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