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CF 405M WGA,荧光染料CF 405M偶联小麦胚芽凝集素的反应步骤
发布时间:2025-11-21     作者:axc   分享到:

CF 405M WGA,荧光染料CF 405M偶联小麦胚芽凝集素的反应步骤

CF 405M WGA 是一种由荧光染料 CF 405M 与小麦胚芽凝集素(WGA)共价偶联形成的生物标记物,用于细胞和组织的荧光标记实验。CF 405M 是蓝色荧光染料,激发波长约为 400 纳米,发射波长约为 425 纳米,具有高亮度和良好光稳定性。WGA 是一种能够特异识别糖类结构的凝集素,可结合细胞膜上的 N-乙酰氨基葡萄糖和唾液酸残基。通过将 CF 405M 与 WGA 偶联,形成 CF 405M WGA 后,可以在显微成像实验中观察细胞膜结构、糖类分布及组织形态,为多通道荧光成像提供可靠工具。

CF 405M WGA 的制备首先需要活化荧光染料分子。CF 405M 通常以活性酯或异硫氰酸酯形式存在,这类活性基团能够与 WGA 蛋白分子的氨基反应,形成稳定的共价键。在反应前,WGA 蛋白通常溶解于适当的缓冲液中,如碳酸盐缓冲液,保持蛋白质结构完整,并提供良好的反应环境。缓冲液的 pH 通常控制在轻微碱性,以保证氨基的亲核活性,同时避免蛋白质变性。

在实际反应步骤中,CF 405M 活性酯被缓慢加入 WGA 溶液中,以控制反应速率并防止过量荧光染料引起蛋白质交联或非特异性标记。反应过程中,WGA 蛋白分子上的氨基以亲核方式攻击 CF 405M 活性酯的碳原子,形成稳定的酰胺键。Covalent 键形成后,染料分子被牢固地偶联到 WGA 蛋白上,保证标记的稳定性和荧光性能。反应通常在室温下进行,避免高温导致蛋白质变性,同时反应时间控制在适当范围,以实现高效偶联。

反应完成后,混合体系中会存在未反应的自由 CF 405M 分子,需要通过纯化步骤去除。常用的纯化方法包括凝胶过滤色谱或透析,这些方法可以有效分离未结合的染料分子,同时保持 CF 405M WGA 的蛋白活性和荧光特性。纯化后的产品通常在缓冲液中储存,并避光保存,以延长荧光稳定性。

整个偶联过程的关键在于控制反应条件和比例,确保 WGA 的糖类识别功能不受影响,同时保持荧光染料的亮度和稳定性。CF 405M 的蓝色荧光可以与其他颜色的荧光染料组合使用,实现多通道共定位实验。通过这种偶联方法,研究人员可以在活细胞或固定细胞实验中精确观察细胞膜的糖类分布、细胞边界以及组织结构,为细胞生物学、组织学和神经科学研究提供直观可视化手段。

产品名称:CF 405M WGA 

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

CF 405M WGA

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09


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