AF 488 WGA，小麦胚芽凝集素共价偶联Alexa Fluor 488 荧光染料的合成路线

AF 488 WGA 是由小麦胚芽凝集素（Wheat Germ Agglutinin, WGA）与 Alexa Fluor 488 荧光染料共价偶联形成的标记物，用于细胞膜和组织的荧光成像。Alexa Fluor 488 是一种绿色荧光染料，激发波长约为 495 纳米，发射波长约为 519 纳米，具有高量子产率和良好光稳定性。WGA 能够特异识别细胞膜或组织表面的 N-乙酰氨基葡萄糖和唾液酸残基，因此 AF 488 WGA 结合了蛋白质特异识别能力与荧光信号，可用于细胞膜标记、组织切片观察及糖类分布研究。其合成路线主要围绕荧光染料活性化和蛋白偶联两大核心步骤展开。

合成路线的第一步是荧光染料的活化。Alexa Fluor 488 通常以 N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS ester）形式提供，这种活性基团能够在温和条件下与蛋白质的氨基反应，形成稳定的酰胺键。在此步骤中，荧光染料溶解于适当的有机溶剂如 DMSO 或 DMF 中，保证活性基团不水解，同时为后续与蛋白质偶联提供可反应的状态。活化的 AF 488 保持其荧光特性，并能在水相体系中高效反应。

第二步是 WGA 蛋白的溶解和缓冲处理。WGA 蛋白质溶解于适当的缓冲液中，如碳酸盐或磷酸盐缓冲液，pH 通常控制在 7.5–8.5 之间，以保证赖氨酸残基氨基的亲核活性，同时避免蛋白质构象破坏。此步骤的关键是维持蛋白质的天然构象和糖结合活性，为后续荧光偶联提供稳定的底物。

第三步是荧光染料与 WGA 的偶联反应。活化的 AF 488 NHS ester 被缓慢加入 WGA 溶液中，赖氨酸氨基对 NHS 酯的羰基发生亲核攻击，形成稳定的酰胺键，将荧光染料牢固地连接在蛋白质上。反应通常在室温或略低温度下进行，避免蛋白质变性，同时反应时间控制在数小时到过夜，保证偶联充分且高效。缓慢加入染料有助于控制标记密度，防止过量染料导致蛋白质交联或结构受损。

偶联完成后，需要去除未反应的自由荧光染料以获得纯净产物。这一步通常通过凝胶过滤、透析或层析方法实现。纯化过程中，保持缓冲体系温和且避光，以防荧光染料漂白。纯化后的 AF 488 WGA 保持高荧光亮度和 WGA 的糖类识别功能，同时减少非特异性结合和背景信号。

最终产物 AF 488 WGA 可以储存在缓冲液中或冻干保存，避光保存以延长荧光稳定性。通过这一合成路线，AF 488 WGA 获得稳定的共价连接结构，荧光信号可靠且适合多通道成像实验。在实验应用中，可用于细胞膜标记、组织切片观察、糖类分布分析以及多通道共定位实验，结合 WGA 的糖类识别特性和 AF 488 的绿色荧光特性，实现高灵敏度和高稳定性的标记效果。

产品名称：AF 488 WGA 

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

RB-聚乙二醇-透明质酸，RhodamineB-PEG-Hyaluronate，

RB-聚乙二醇-细胞色素C，RhodamineB-PEG-Cytochrome c，

RB-聚乙二醇-线肽，RhodamineB-PEG-RGD，

RB-聚乙二醇-叶酸，RhodamineB-PEG-FA，

RB-聚乙二醇-脂多糖，RhodamineB-PEG-Lipopolysaccharides，

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09