Cyanine 3 TSA，Cyanine 3 荧光染料酚基底物的特性

Cyanine 3 TSA（Cyanine 3 Tyramide Signal Amplification）是一种基于酶介导的荧光信号放大标记体系，结合了 Cyanine 3 荧光染料和酚基底物（tyramide）特性，广泛应用于免疫组化、原位杂交及低丰度分子检测实验。Cyanine 3 是一种橙红色荧光染料，激发波长约为 550 纳米，发射波长约为 570 纳米，具有较高量子产率和光稳定性。Cyanine 3 TSA 的核心优势在于通过辣根过氧化物酶（HRP）催化形成活性自由基，使荧光标记分子共价沉积于靶标区域，实现信号放大。其反应条件在实验设计中起着关键作用，直接影响偶联效率、信号强度及背景水平。

Cyanine 3 TSA 的反应条件首先涉及底物和酶体系的准备。Tyramide-Cy3 分子通常溶解于适当缓冲液中，如磷酸盐缓冲液（PBS），以保证水溶性和分子稳定性。HRP 标记的二抗或直接标记抗体用于将底物靶向到目标蛋白或核酸区域。反应体系的 pH 通常保持在轻微中性至弱碱性（pH 7–8），以维持 HRP 活性和避免染料降解。溶液温度一般控制在室温，过高温度可能导致酶失活或荧光漂白，而过低温度则会降低反应速率。

反应的核心步骤是 HRP 催化 Cyanine 3 tyramide 的氧化反应。在存在过氧化氢（H₂O₂）的条件下，HRP 将 tyramide 基团氧化生成酚自由基，这些高度活性的自由基能够迅速与邻近的蛋白质或芳香基团形成共价键，将 Cyanine 3 荧光染料沉积在靶标区域。反应时间通常控制在几分钟到十几分钟，根据实验目标分子丰度、酶活性和信号强度进行优化。时间过短可能导致信号弱，时间过长则可能增加非特异性背景。

反应体系中底物浓度对偶联效率和信号质量至关重要。Cyanine 3 tyramide 的浓度需在保证充分偶联的同时避免过量沉积引起背景信号。过高浓度可能导致非特异性沉积和信号扩散，而过低浓度则会降低信号强度。在实际实验中，通常通过梯度浓度试验确定最佳浓度范围，以兼顾信号亮度与空间分辨率。

此外，反应后处理条件也影响 Cyanine 3 TSA 的效果。偶联完成后需要通过洗涤去除未反应的底物和自由染料，通常使用缓冲液轻柔洗涤以维持蛋白质构象和细胞结构完整性。同时，为减少荧光漂白，实验过程中避免强光照射，并可添加抗漂白剂。最终成像可通过荧光显微镜进行多通道观察，Cyanine 3 的橙红色信号与其他荧光染料可实现共定位分析。

产品名称：Cyanine 3 TSA

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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