Cal-520-Biocytin Conjugate，荧光染料 Cal-520偶联生物素衍生物的细胞成像

Cal-520-Biocytin Conjugate 是一种由荧光染料 Cal-520 与生物素衍生物 Biocytin 共价偶联形成的标记分子，广泛应用于神经科学、细胞成像及生物分子追踪实验。Cal-520 是一种水溶性绿色荧光染料，激发波长约为 490 纳米，发射波长约为 514 纳米，具有高量子产率和良好的光稳定性。Biocytin 是生物素（biotin）与赖氨酸衍生物偶联形成的底物，保留生物素高亲和力的同时可通过氨基官能团参与共价偶联反应。Cal-520-Biocytin Conjugate 的化学反应原理主要依赖于荧光染料活性化与 Biocytin 上氨基的亲核攻击反应，实现稳定的共价结合。

其化学反应原理首先涉及荧光染料的活化。Cal-520 常以 N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS ester）形式提供，这种活性酯能够在温和水性缓冲液或有机溶剂体系中与氨基反应形成稳定的酰胺键。NHS 酯在缓冲液中保持高反应性，但在水中易被水解，因此通常在 pH 7–8.5 的缓冲液中快速反应，以保证偶联效率。该活化步骤使 Cal-520 获得可与 Biocytin 氨基反应的化学活性，同时保持其荧光性质和水溶性。

接下来的关键步骤是 Biocytin 氨基的亲核攻击。Biocytin 分子中的 ε-氨基具有良好的亲核性，可对 Cal-520 的 NHS 酯进行加成反应，形成稳定的酰胺键。这一反应过程是共价偶联的核心，保证荧光染料牢固附着在 Biocytin 分子上，同时不会影响生物素部分的空间构象和结合活性。由于形成的是稳定的酰胺键，偶联产物在后续实验操作、洗涤和成像中具有良好的化学稳定性和荧光保持能力。

反应体系的 pH、温度和底物浓度对偶联效率具有重要影响。中性至微碱性缓冲液能够维持氨基的亲核性和 NHS 酯的活性；过高的 pH 可能加速 NHS 酯水解，而过低的 pH 会降低氨基的反应性。温和温度（室温或略低）可保证蛋白质或 Biocytin 稳定，同时避免荧光染料漂白。底物摩尔比需合理控制，以避免过量染料引起分子交联或空间阻碍，同时保证偶联充分。

偶联完成后，通常需要通过凝胶过滤、透析或层析方法去除未反应的自由染料和副产物，得到纯净的 Cal-520-Biocytin Conjugate。纯化后，产物保持水溶性、荧光稳定，并保留 Biocytin 的生物素结合能力，可进一步与 Streptavidin 或 NeutrAvidin 系统结合，用于标记抗体、蛋白或细胞结构，实现可视化检测和高灵敏度信号增强。

产品名称：Cal-520-Biocytin Conjugate 

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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