产品名称：Alexa Fluor 532蛋白标记试剂盒，AF532蛋白标记试剂盒

Alexa Fluor 532 蛋白标记试剂盒（AF532 蛋白标记试剂盒）是一款标准化的蛋白荧光标记工具，核心组件包括 Alexa Fluor 532（AF532）活性酯试剂、优化的反应缓冲液、淬灭试剂及纯化试剂，旨在通过简单高效的流程，实现对抗体、酶、细胞因子等蛋白分子的 AF532 荧光标记，同时最大限度保留蛋白生物活性，适用于科研人员快速制备高质量荧光标记蛋白，满足多场景成像与检测需求。

从组件功能与标记原理来看，各部分协同保障标记效率与蛋白活性：核心标记试剂为 Alexa Fluor 532 NHS 酯（AF532 NHS），其分子结构含 AF532 荧光染料与 NHS 酯基团 ——AF532 是一款性能优异的黄绿色荧光染料，激发波长约为 532nm（可被共聚焦显微镜常用的 532nm 激光器激发），发射波长约为 554nm，荧光量子产率高（约 0.78），光稳定性是传统罗丹明类染料的 1.5 倍以上，且对 pH 值不敏感（在 pH 4-10 范围内荧光稳定），即使在细胞内复杂环境中也能保持明亮且稳定的荧光信号；NHS 酯基团作为经典的氨基反应活性位点，可在优化的反应缓冲液（通常为 0.1M 碳酸钠缓冲液，pH 8.3-8.5）中，与蛋白的伯氨基（如赖氨酸残基、N 端氨基）特异性反应，形成稳定的酰胺键，反应效率高（偶联率通常 > 85%），且无需额外添加活化剂（如 EDC），简化操作步骤。

试剂盒中的优化反应缓冲液是保障蛋白活性的关键：传统标记实验中，若缓冲液 pH 值不当或含氨基类物质（如 Tris），会导致染料与缓冲液成分非特异性反应，降低标记效率，甚至影响蛋白活性；而该试剂盒的缓冲液经过特殊设计，不含氨基类物质，且 pH 值精准控制在 8.3-8.5—— 此 pH 条件可提高蛋白氨基的亲核性，促进与 NHS 酯的反应，同时避免因 pH 过高导致蛋白变性（如抗体的抗原结合位点破坏），确保标记后蛋白仍保持原有生物活性（如抗体的特异性结合能力、酶的催化活性），活性保留率通常 > 80%。

淬灭试剂与纯化试剂则保障标记产物的纯度与实用性：淬灭试剂（如氨基乙醇）用于反应结束后快速终止反应，通过与未反应的 AF532 NHS 结合，避免其继续与蛋白作用导致过度标记（过度标记会引发蛋白聚集、活性下降）；纯化试剂通常为预装脱盐柱或离心柱，内含葡聚糖凝胶（如 Sephadex G-25），可通过凝胶过滤色谱原理，快速去除未反应的游离 AF532 染料、淬灭试剂及反应副产物（如 NHS），获得高纯度的 AF532 标记蛋白 —— 纯化后的蛋白不含游离染料干扰，可直接用于后续实验（如免疫荧光、流式细胞术），无需额外透析处理，大幅缩短实验周期。

该试剂盒的核心优势在于 “标准化、高兼容性、易质控”：标准化流程降低实验门槛 —— 试剂盒提供详细的操作说明书，明确蛋白与染料的最佳比例（通常为 100μg 蛋白对应 5-10μg 染料）、反应时间（1-2 小时）、纯化步骤，用户无需自行优化条件，即使新手也能获得稳定的标记效果；高兼容性适用于多种蛋白类型 —— 可标记分子量范围广（10kDa-200kDa）、浓度范围宽（10-200μg 蛋白）的蛋白，包括单克隆抗体、多克隆抗体、酶（如 HRP、碱性磷酸酶）、细胞因子（如 IL-2、TNF-α）、凝集素等，且对不同来源的蛋白（如鼠源、兔源、人源抗体）均有良好适应性；易质控便于评估标记效果 —— 试剂盒提供标记率计算方法（通过紫外 - 可见分光光度法，分别检测蛋白在 280nm、染料在 532nm 的吸光度，代入公式计算每个蛋白分子结合的 AF532 分子数），标记率通常可控制在 1-4 之间，此范围既能保证充足的荧光信号强度，又不会因染料过多导致蛋白聚集或活性下降。

其应用场景覆盖生物医学研究多个领域：在免疫荧光成像中，用于标记一抗或二抗 —— 例如，AF532 标记的抗 β- 微管蛋白抗体可用于观察细胞微管的分布与动态，AF532 标记的抗兔 IgG 二抗可与兔源一抗联用，检测细胞内特定抗原（如 p53 蛋白）的定位；在流式细胞术中，用于标记特异性抗体 —— 例如，AF532 标记的抗 CD11b 抗体可用于识别单核细胞、巨噬细胞，结合其他荧光抗体（如 AF 488 抗 CD45、AF 647 抗 Ly6C）实现免疫细胞的多色分型；在免疫印迹（Western Blot）中，用于标记二抗 —— 通过荧光成像仪检测目标蛋白的条带，相较于化学发光检测，荧光检测具有线性范围宽（可实现半定量分析）、信号稳定（无需立即检测，条带可保存数天）的优势；在细胞分选（FACS）中，用于标记目标抗原抗体，分选表达特定抗原的细胞群体（如 CD4⁺CD25⁺调节性 T 细胞），为后续的功能研究（如细胞培养、RNA 测序）提供纯化细胞；在蛋白相互作用研究中，用于标记诱饵蛋白（如 AF532 标记的受体蛋白），通过荧光共振能量转移（FRET）实验检测其与配体蛋白的相互作用，分析结合亲和力与动力学参数；此外，还可用于细胞黏附、细胞迁移等功能实验，通过荧光信号追踪蛋白在细胞内的动态变化，揭示其在生理过程中的作用机制。

产地：西安

规格：50mg 100mg 500mg

纯度：95%

状态：固体/粉末

储藏条件：冷藏

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发，生产，销售为一体的高科技企业，可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等，可以满足不同客户的定制需求。

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小编：HLL 2025年11月20日