产品名称:fam N3,Fam-azide,5-羧基荧光素叠氮化物
fam N3(Fam-azide),即 5 - 羧基荧光素叠氮化物,是 5 - 羧基荧光素(5-FAM)的叠氮衍生物,分子结构由 5-FAM 荧光母核与末端叠氮基团(-N₃)构成,核心功能是结合 5-FAM 的荧光成像能力与叠氮的生物正交反应活性,实现对含炔基或环炔生物分子的特异性荧光标记,是生物医学研究中常用的 “荧光 - 点击化学” 双功能试剂。
5-FAM 荧光母核赋予该试剂优异的光学基础:激发波长约为 495nm,发射波长约为 520nm,荧光量子产率高(约 0.92),在可见光区具有极强的荧光信号,可被常规荧光检测设备(如荧光显微镜、流式细胞仪、酶标仪)高效捕获。其荧光特性稳定,对 pH 值的耐受范围较宽(pH 5-9),在细胞内中性或弱酸性环境中(如细胞质、内体)仍能保持明亮荧光,仅在强酸性条件(pH<4)下会因质子化导致荧光猝灭,这对大部分生物实验场景影响极小。此外,5-FAM 的分子尺寸较小(分子量约 376Da),标记生物分子后对其空间结构与生物活性的干扰较小 —— 例如,标记短肽时,5-FAM 的存在不会显著影响肽与受体的结合亲和力,确保实验结果的可靠性。
叠氮基团(-N₃)是该试剂的关键反应位点,其化学性质决定了其在生物正交反应中的核心作用:叠氮是典型的 “点击化学” 官能团,可通过两种高效、特异性反应与炔基类基团偶联 —— 一是铜(I)催化的 Huisgen 环加成反应(CuAAC),在 CuSO₄与抗坏血酸钠(提供 Cu⁺)的催化下,叠氮与末端炔基(-C≡CH)快速反应形成稳定的 1,2,3 - 三唑环,反应速率常数约为 10²-10³ M⁻¹s⁻¹,适用于体外生物分子修饰(如蛋白、核酸、小分子的标记),且反应条件温和(室温、中性 pH),副产物无毒性;二是无铜催化的应变促进环加成反应(SPAAC),叠氮可与环张力环炔(如 DBCO、BCN、DIBO)在无催化剂条件下自发反应,反应速率常数更高(约 10³-10⁴ M⁻¹s⁻¹),且对细胞毒性极低,适用于活细胞、活体等复杂生物体系的标记,避免铜离子对细胞的损伤(如氧化应激、酶活性抑制)。这种 “双反应模式” 使 fam N3 可灵活适配不同实验需求,无论是体外分子修饰还是体内成像均可适用。
该试剂的应用场景广泛,核心围绕 “荧光标记 + 点击化学” 展开:在分子生物学领域,可用于炔基修饰的 DNA/RNA 标记 —— 例如,将 fam N3 与 5' 端炔基修饰的 siRNA 通过 CuAAC 反应偶联,制备荧光 siRNA,通过荧光信号追踪 siRNA 在细胞内的摄取过程(如从细胞膜到细胞质、细胞核的转运),评估基因递送系统的效率;也可用于炔基修饰的 DNA 探针标记,制备荧光原位杂交(FISH)探针,检测染色体特定基因序列(如肿瘤相关基因突变位点)或细胞内 mRNA 的表达水平。
在蛋白与多肽研究中,可用于炔基修饰蛋白或多肽的标记 —— 例如,通过基因工程在蛋白中引入含炔基的非天然氨基酸(如炔丙基甘氨酸),或通过化学修饰在多肽的半胱氨酸残基引入炔基,再与 fam N3 反应实现荧光标记,用于蛋白定位(如通过共聚焦显微镜观察蛋白在细胞内的亚细胞分布)、蛋白相互作用研究(如通过荧光共振能量转移 FRET 检测与靶蛋白的结合);还可用于标记炔基修饰的靶向肽(如 RGD 肽、TAT 穿膜肽),通过荧光成像观察肽在动物体内的组织分布与肿瘤靶向富集情况,评估其作为药物载体的潜力。
在活细胞成像中,是无铜点击标记的理想工具 —— 例如,将炔基修饰的脂质(如炔基胆固醇)掺入活细胞膜,再加入 fam N3 通过 SPAAC 反应标记细胞膜,实时观察细胞膜的动态变化(如膜流动性、细胞融合过程);或用炔基修饰的糖分子(如 N - 炔丙基葡糖胺)喂养细胞,使其参与细胞表面糖萼的合成,再与 fam N3 反应标记糖萼,研究糖萼在细胞黏附、信号传导中的作用;此外,还可用于活细胞内蛋白合成的追踪 —— 通过炔基修饰的甲硫氨酸类似物(如 AHA)掺入新合成的蛋白,再与 fam N3 反应,荧光标记新合成蛋白,观察蛋白的合成速率与降解动力学。
在药物研发与检测中,可用于炔基修饰小分子药物的标记 —— 例如,将 fam N3 与炔基修饰的化疗药物(如炔基紫杉醇)偶联,通过荧光信号追踪药物在细胞内的靶点结合(如与微管蛋白的结合位点)、亚细胞分布(如是否进入细胞核)及排泄途径,为药物结构优化提供可视化依据;也可用于药物筛选,通过检测药物处理后细胞内特定靶点(如炔基修饰的酶)与 fam N3 标记探针的结合情况,评估药物的抑制活性。
产地:西安
规格:50mg 100mg 500mg
纯度:95%
状态:固体/粉末
储藏条件:冷藏
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!
西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

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小编:HLL 2025年11月20日




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