AF488-TSA，Alexa Fluor 488酪胺，反应原理

AF488-TSA 属于酪胺信号放大（Tyramide Signal Amplification, TSA）系统的荧光底物。其核心结构由 Alexa Fluor 488 荧光团与酪胺分子通过化学键连接而成。酪胺可以在过氧化物酶（如 HRP, horseradish peroxidase）催化下形成高度活泼的自由基，能够与附近的芳香族氨基酸残基共价结合，实现靶分子的荧光标记。

反应原理主要包括以下几个步骤：

1. 酪胺氧化：在存在过氧化氢（H₂O₂）和 HRP 的条件下，AF488-TSA 中的酪胺氨基被氧化，形成短寿命的自由基。这一过程中 HRP 催化 H₂O₂ 将酪胺底物氧化为活性自由基，反应速度快且高度局域化。

2. 自由基共价结合：生成的酪胺自由基具有很强的亲电子性，可与靶蛋白或附近组织中的芳香族氨基酸残基（如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸）形成共价键。这种结合是不可逆的，使荧光团牢固地附着在靶分子附近。

3. 荧光信号增强：由于一个 HRP 分子可以催化多个酪胺底物形成自由基，因此在靶蛋白附近会沉积大量 AF488 荧光分子，实现信号放大。与直接标记抗体相比，TSA 系统可以显著提高低丰度靶标的检测灵敏度，同时保持空间分辨率。

4. 空间局域性：由于自由基寿命短，反应主要发生在 HRP 附近，染料的沉积高度局域化。这保证了信号增强不会扩散到非靶区域，从而减少背景噪声。

5. 荧光特性：AF488 激发波长约为 495 nm，发射波长约为 519 nm，发射在绿光区，光稳定性强、亮度高，适合与其他荧光染料联合进行多色成像。

AF488-TSA 的应用优势在于低丰度靶标的高灵敏检测。通过与一抗或二抗偶联的 HRP 结合，AF488-TSA 在催化下在靶分子附近沉积大量荧光分子，实现荧光信号的显著放大。由于标记是共价结合，标记后的荧光分子在随后的洗涤和成像过程中保持稳定，不易脱落。

使用时需要注意：反应体系中应控制 H₂O₂ 浓度和反应时间，以避免非特异性沉积或组织损伤。反应过程中应避光操作，减少荧光淬灭。实验完成后可进行常规封片或成像，获得高信噪比的荧光信号。

产品名称：AF488-TSA 

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

花菁染料CY5标记胆固醇 CY5-Cholesterol

花菁染料CY5标记胆红素 Cy5-Bilirubin

花菁染料CY5标记胆碱 CY5-choline

花菁染料CY5标记胆酸 Cy5-Cholate

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09