CAS号：2182601-71-2，Cy5-DBCO，Cy5-二环己烯炔荧光偶联试剂的制备方法

Cy5-DBCO 中文名称为“Cy5-二环己烯炔荧光偶联试剂”，其中 Cy5 表示远红荧光染料（激发波长约 650 nm，发射波长约 670 nm），具有高光稳定性和亮度；DBCO 为二环炔结构，可与叠氮官能团分子发生铜自由“点击”反应，实现高效率、特异性的标记。该试剂通常为活性衍生物，用于构建荧光标记蛋白、寡核苷酸或其他生物大分子。

化学组成与特性
Cy5-DBCO 由两部分组成：

1. 荧光染料部分（Cy5）：Cy5 属于氰基偶氮染料（Cyanine dye），其共轭结构赋予远红荧光特性，具有较高的量子产率和光稳定性，可在多色荧光成像中作为远红通道标记。

2. 反应官能团（DBCO）：DBCO 是一种环张力较高的二环炔，能够与叠氮基团快速发生环加成反应（SPAAC），反应无需铜催化剂，避免铜离子对生物分子（如蛋白质或细胞）的潜在毒性。Cy5-DBCO 通过稳定的酰胺或碳链与染料相连，兼具化学稳定性和反应活性。

制备方法
Cy5-DBCO 通常通过化学偶联的方法制备，可分为以下步骤：

1. 原料准备

• Cy5-NHS 酯或 Cy5-活性羧酸衍生物

• DBCO-胺（DBCO-NH₂）

• 干燥有机溶剂（如 DMSO 或 DMF）

• 缓冲体系：可使用干燥的碳酸盐缓冲液或三乙胺（TEA）作为碱性环境以促进酰胺键形成

1. 偶联反应

• 将 Cy5-NHS 酯溶解于干燥溶剂中，加入 DBCO-NH₂ 的摩尔过量，使氨基与 NHS 酯发生亲核加成，生成 Cy5-DBCO 的酰胺键。

• 反应体系应避光，并在室温或略低温下轻轻搅拌，反应时间一般为数小时至过夜，以确保高转化率。

1. 反应监控

• 反应过程中可采用薄层色谱（TLC）或高效液相色谱（HPLC）监控偶联产物形成及未反应底物的消耗。

• 可通过荧光检测确认 Cy5 荧光信号存在，并初步判断标记效率。

1. 产物纯化

• 反应结束后，通过硅胶柱层析或反相高效液相色谱（RP-HPLC）分离 Cy5-DBCO 产物，去除游离 Cy5 或未反应 DBCO。

• 纯化后的产物通常冻干保存或溶解于干燥 DMSO 中储存，避光、低温保存以维持荧光活性。

1. 性能验证

• 纯化后的 Cy5-DBCO 可用于模型叠氮化物分子的 SPAAC 反应验证。

• 可通过质谱、HPLC 或荧光光谱确认结构正确性、纯度及荧光特性。

产品名称：Cy5-DBCO 

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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