AF647 Picolyl Azide，AF647 吡啶基叠氮荧光偶联反应条件

AF647 Picolyl Azide 的中文名称为“AF647 吡啶基叠氮荧光偶联试剂”，其中 AF647 表示远红荧光染料 Alexa Fluor 647，激发波长约 650 nm，发射波长约 668 nm，发射在红光区。Picolyl Azide 为叠氮官能团，通过吡啶环的修饰增强与铜催化炔基点击反应的效率，同时减轻金属离子对生物分子的毒性。AF647 Picolyl Azide 可用于标记蛋白质、抗体、寡核苷酸及其他炔基化生物分子，实现高效、可控的荧光标记。

反应原理与特点
AF647 Picolyl Azide 主要用于 CuAAC 点击反应，其反应特点如下：

1. 铜催化的叠氮-炔基环加成（CuAAC）：

• Picolyl 叠氮与炔基官能团在铜(I)催化下发生 1,3-偶极环加成反应，形成稳定的 1,2,3-三唑环，实现荧光团与靶分子共价结合。

• 吡啶基修饰的叠氮能够螯合铜离子，提高反应速率和选择性，减少副反应。

2. 高选择性与生物相容性：

• 反应仅在叠氮与炔基之间发生，不与蛋白、核酸或其他生物分子上的官能团发生非特异性反应。

• 吡啶基结构在增强反应效率的同时，降低铜离子对细胞或蛋白的潜在毒性，适合在生物体系中使用。

3. 远红荧光特性：

• AF647 发射在 668 nm，减少细胞自体荧光干扰，适合多色荧光实验。

• 可与绿色或橙色荧光染料组合，实现多通道共定位成像。

反应条件

1. 溶剂与溶解性

• AF647 Picolyl Azide 通常溶解于干燥 DMSO 或 DMF 中制备储备液，避光低温保存。

• 标记反应可在水相或缓冲液体系中进行，常用 pH 7–8 的 PBS、HEPES 或 Tris 缓冲液。

2. 铜催化剂

• 使用 Cu(I) 盐（如 CuSO₄ + 还原剂 sodium ascorbate）作为催化剂，Cu(I) 实时生成，保证高效环加成反应。

• 铜浓度一般为微摩尔至毫摩尔级，根据标记分子浓度优化。

3. 反应温度与时间

• 反应通常在室温或略高温度（20–37°C）进行，以保证生物分子活性。

• 反应时间一般为 30 分钟至数小时，可通过荧光检测或 HPLC 监控反应完成情况。

4. 辅助试剂

• 可添加配体（如 THPTA、TBTA）稳定 Cu(I)，提高反应效率并减少氧化副反应。

• 对于蛋白质标记，反应体系可加入低浓度非离子表面活性剂以防止蛋白聚集。

5. 产物纯化

• 反应结束后，可通过透析、凝胶过滤或反相高效液相色谱（RP-HPLC）去除未反应的游离荧光团及铜离子。

• 纯化后的 AF647 标记分子光稳定性高，可用于细胞或体外成像实验。

产品名称：AF647 Picolyl Azide

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09