产品名称：Annexin V FITC，异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V的功能机制与作用原理

1. 结构基础与化学特性

Annexin V核心结构：

分子量约35-36 kDa，由319个氨基酸组成，含4个保守重复单元（每个约75个氨基酸）形成α-螺旋盘状结构，包含钙离子结合位点。其钙依赖性磷脂结合特性使其对PS具有高亲和力（解离常数约10⁻⁹ M）。

关键修饰位点（如Trp185、Lys286/290）影响钙结合与膜相互作用，过度标记（如>2个荧光基团）可能丧失活性。

FITC标记特性：

通过异硫氰酸酯基团与Annexin V的氨基共价偶联，形成稳定复合物。激发波长494 nm，发射波长516-518 nm（绿色荧光），量子产率高，光稳定性优于传统染料。

保存与稳定性：

需避光、-20℃保存，避免反复冻融；缓冲液含2.5 mM CaCl₂以维持PS结合能力。FITC易淬灭，需避免长时间暴露于光或高温。

2. 功能机制与作用原理

凋亡检测原理：

正常细胞中PS位于膜内侧；凋亡早期PS外翻至膜外侧，Annexin V通过钙依赖性结合PS，FITC标记使其在荧光显微镜/流式细胞仪下显影。

联合碘化丙啶（PI）可区分阶段：活细胞（双阴性）、早期凋亡（FITC+/PI⁻）、晚期凋亡/坏死（双阳性）、坏死细胞（FITC⁻/PI⁺）。PI仅穿透膜完整性丧失的细胞，与DNA结合发红光（激发535 nm，发射617 nm）。

实验操作关键：

样本需用不含EDTA的胰酶消化（避免钙螯合），离心速度≤500×g，细胞浓度1×10⁶-1×10⁷个/mL。孵育时间15-20分钟，避光操作，避免过度染色导致假阳性。

关于我们：

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