AF488-LPC,AF488标记溶血磷脂酰胆碱的偶联反应条件
AF488-LPC 是一种将绿色荧光染料 Alexa Fluor 488(AF488)与溶血磷脂酰胆碱(Lysophosphatidylcholine, LPC)通过化学偶联形成的复合分子。LPC 是一种单脂链磷脂类分子,由甘油骨架、一个脂肪酸链、磷酸基团及胆碱头基组成,具有两亲性结构:脂肪酸链疏水,而磷酸胆碱头基亲水,使其在水溶液中呈胶束状分散或与脂质膜结合。AF488 是苯并吡咯类绿色荧光染料,带有活性 N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester)官能团,可与 LPC 分子上的氨基或改性羟基发生共价偶联,形成稳定的酰胺键或酯键,实现荧光标记。AF488-LPC 分子结构可划分为荧光信号域、连接桥域和两亲性功能域。荧光信号域提供绿色荧光,连接桥域通过共价键将染料与 LPC 固定,两亲性功能域保留 LPC 的甘油骨架、脂肪酸链和磷酸胆碱头基,使复合物在溶液中分散均匀并保持化学完整性。
AF488-LPC 的偶联反应条件设计关键在于保持 LPC 两亲性结构和 AF488 荧光性能的完整性。通常,反应体系采用温和条件,溶剂选择能够溶解两者且不破坏脂质结构,例如含少量有机溶剂(DMSO 或 DMF)与水相缓冲液混合体系。反应 pH 需控制在中性或轻微碱性(pH 7–8),以保证 NHS 酯的活性同时避免脂质水解。温度一般保持在室温至 37°C,以减少 LPC 脂链氧化或结构破坏。
偶联过程中,AF488 的 NHS 酯活化端可与 LPC 分子上羟基或改性氨基形成共价酯键或酰胺键。连接桥域的设计通常采用短链柔性结构,保证荧光信号域与 LPC 两亲性域空间分离,避免 steric hindrance 干扰及荧光淬灭。偶联时间一般为数小时至一夜,确保反应充分完成。
反应完成后,AF488-LPC 需要经过纯化以去除未反应的染料和副产物。常用纯化方法包括透析、凝胶过滤或硅胶柱色谱。纯化后复合物在水相或缓冲体系中呈胶束状分散,保持两亲性分子特性,并可通过显微镜或荧光检测系统直接观察绿色荧光。复合物吸收峰约 495 nm,发射峰约 519 nm,荧光信号稳定。
AF488-LPC 的反应条件设计保证了复合物的功能整合。荧光信号域提供可观测的绿色荧光,LPC 两亲性功能域保持脂质行为特性,使复合物可用于脂质膜模拟体系、脂质体或脂质纳米颗粒研究。通过荧光信号,可追踪 LPC 在膜体系、脂质微环境或细胞体系中的分布、吸附和迁移行为。
此外,AF488-LPC 可应用于多通道荧光实验和共定位分析。复合物在缓冲液或水相体系中分散均匀,避免聚集,保证荧光信号均一且可重复。通过调控偶联比例和连接桥长度,可优化荧光强度、分子均一性及脂质分散性,满足不同实验需求。
综上所述,AF488-LPC 是一种结合绿色荧光信号与溶血磷脂酰胆碱两亲性功能的复合分子,其反应条件包括温和溶剂体系、中性至轻碱性 pH、室温至 37°C 温度及适宜反应时间。复合物通过荧光信号域、连接桥域和两亲性功能域整合,实现光学可视化与脂质功能的结合,具有分散均匀、荧光稳定和化学结构完整的特点,可用于脂质膜研究、脂质体分布分析及分子示踪实验。
产品名称:AF488-LPC
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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