Alexa Fluor555-NHS，AF555-活性酯的合成过程概述

Alexa Fluor 555-NHS（简称AF555-NHS）是一种水溶性荧光染料的活性衍生物，属于Alexa Fluor染料系列。其吸收波长约为555 nm，发射波长约为565–570 nm，具有稳定的荧光信号和较高的量子产率。AF555-NHS特别设计用于与含游离氨基的生物分子（如蛋白质、肽和多肽）发生共价偶联，从而实现荧光标记和可视化分析。AF555-NHS通过其NHS酯官能团提供高度反应性，使染料能够在温和条件下与目标分子形成稳定的酰胺键。

结构特点

AF555-NHS的分子结构可分为三个部分：荧光核心、极性修饰基团和NHS活性酯官能团。

1. 荧光核心
   荧光核心通常为共轭芳香族或苯并呋喃环体系，提供稳定的共轭电子系统，实现高量子产率和耐光性。共轭体系的设计保证染料在紫外-可见光区域具有特定吸收峰和发射峰，使其适用于光学显微镜、流式细胞术和荧光成像等实验。

2. 极性修饰基团
   为提高水溶性，AF555分子通常在核心结构上引入亲水性侧链或离子性基团，如磺酸盐、羟基或羧基。这些修饰基团不仅增强染料在水溶液中的分散性，还减少聚集和非特异性吸附，提高生物实验中标记的可靠性。

3. NHS活性酯官能团
   分子末端的NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）酯为活性位点，可与生物分子上的游离氨基发生亲核取代反应，形成稳定的酰胺键。NHS酯具有较高反应性，在弱碱性条件（pH 7.2–8.5）下能迅速发生反应，同时避免水解导致的产物损失。

合成过程概述

AF555-NHS的合成通常分为三个主要阶段：荧光核心构建、功能化修饰和活化NHS酯化。

1. 荧光核心构建
   荧光核心通常通过多步有机合成获得，包括芳香族环的偶氮化、环化及取代反应。该步骤的关键是建立稳定的共轭体系，保证最终染料具有所需的吸收和发射特性。合成过程中需要控制温度、溶剂体系和pH，以实现高收率和结构选择性。

2. 极性修饰
   在荧光核心形成后，通过引入磺酸盐、羧基或其他亲水性官能团实现水溶性增强。这些修饰通常通过醚化、酯化或烷基化反应完成，确保染料在水溶液中稳定分散，同时不会显著影响光学性能。

3. NHS活化
   在羧基官能团上引入NHS酯，将羧基活化为易于与氨基偶联的形式。该步骤通常使用DCC（N,N’-二环己基碳二亚胺）或EDC（1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺）作为脱水试剂，将羧基转化为NHS酯。反应需在干燥溶剂和避光条件下进行，以防止水解和荧光损失。

结构确认与表征

合成完成的AF555-NHS通常通过多种分析手段进行表征，包括：质谱（MS）验证分子量，核磁共振（NMR）确认结构完整性，紫外-可见吸收光谱和荧光光谱测定光学性质。通过这些表征方法可以确保NHS酯活性、荧光强度及水溶性满足后续生物偶联实验的要求。

产品名称：Alexa Fluor 555-NHS

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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