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CY3.5-Fibrinogen,CY3.5标记纤维蛋白原的制备方法
发布时间:2025-12-03     作者:axc   分享到:

CY3.5-Fibrinogen,CY3.5标记纤维蛋白原的制备方法

CY3.5-Fibrinogen 是在纤维蛋白原(Fibrinogen)分子上引入 CY3.5 荧光基团后的衍生物,用于实现该血浆蛋白在溶液、材料及生物体系中的可视化。纤维蛋白原是一种高分子量、三聚体结构的糖蛋白,由三条不同链组成,分子中含有大量的氨基和羧基官能团,使其在水溶液中具有良好溶解性和一定的反应活性。天然纤维蛋白原缺乏可直接观测的荧光信号,难以在生物实验中追踪其分布、聚集及形成纤维化的动态过程。通过 CY3.5 标记,纤维蛋白原分子获得稳定的荧光信号,使其在共聚焦显微镜、荧光成像及流式分析中能够实时追踪,从而研究蛋白分布、聚集及与细胞或材料的相互作用。

CY3.5-Fibrinogen 的制备方法通常包括活化荧光染料、与蛋白结合以及产物纯化三个主要步骤。首先,选择 CY3.5-NHS 酯作为活化试剂,使其羧基形成活化酯,呈高亲电性,便于与纤维蛋白原中的伯氨基发生共价反应。在反应过程中,纤维蛋白原中的氨基孤对电子对活化酯碳原子进行亲核攻击,形成稳定的酰胺键,同时释放 N-羟基琥珀酰亚胺作为小分子副产物。整个反应通常在温和缓冲体系中进行,pH 维持在 7.2–8.5 之间,以保证蛋白质构象和功能性不受破坏,同时避免过高温度或有机溶剂造成蛋白变性。

其次,在荧光染料与蛋白反应过程中,需要控制摩尔比和反应时间,以调节标记程度,避免过度标记导致蛋白聚集或功能受损。通常荧光染料的摩尔比略高于蛋白分子中的可反应氨基数量,以提高标记效率但不影响蛋白天然结构和可溶性。反应时间一般控制在数小时至过夜,保证充分反应而不产生副反应。过程中可使用温和缓冲体系,如磷酸盐缓冲液或碳酸盐缓冲液,以维持蛋白稳定性。

最后,标记产物需要经过纯化以去除未反应的 CY3.5 染料及小分子副产物。常用纯化方法包括透析、凝胶过滤或离心过滤柱,通过荧光信号确认产物存在并评估标记效率。纯化后的 CY3.5-Fibrinogen 在水溶液中表现出良好的分散性和稳定性,荧光信号均匀且可重复检测,可用于进一步实验如细胞粘附、血栓形成及材料表面功能化研究。

总体而言,CY3.5-Fibrinogen 的制备方法体现了活化荧光染料与蛋白氨基的共价结合、温和反应条件和产物纯化三个核心步骤。通过合理控制反应条件和标记程度,可获得稳定、功能完整且荧光均一的纤维蛋白原衍生物,使其在生物体系、材料研究及功能化实验中兼具光学追踪能力和化学活性,为蛋白质行为观察和生物实验提供可靠工具和数据支持。

产品名称:CY3.5-Fibrinogen

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

CY3.5-Fibrinogen

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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