CY3.5-HSA,CY3.5标记人血清白蛋白的反应条件
CY3.5-HSA 是在人血清白蛋白(Human Serum Albumin, HSA)分子上引入 CY3.5 荧光基团后的衍生物,用于实现该高分子量血浆蛋白在溶液、材料及生物体系中的可视化。HSA 是一种单链蛋白,分子量约 66 kDa,含有大量可反应的氨基和羧基官能团,具有良好的溶解性和化学反应活性。天然 HSA 缺乏可直接观测的荧光信号,难以在生物实验或材料体系中追踪其分布、结合及迁移行为。通过 CY3.5 标记,HSA 分子获得稳定的荧光信号,可在共聚焦显微镜、荧光成像及流式分析中实现可视化追踪,从而研究蛋白分布、聚集及与细胞或材料的相互作用。
CY3.5-HSA 的反应通常依赖 HSA 中伯氨基与 CY3.5 活化酯的共价结合。常用的 CY3.5 活化试剂为 NHS 酯衍生物,其羧基经过活化形成高亲电性的 N-羟基琥珀酰亚胺酯,可与 HSA 分子中的赖氨酸侧链氨基或 N 端氨基发生亲核加成反应生成稳定的酰胺键。在反应条件设计上,为保持 HSA 构象和功能完整,通常选择温和缓冲体系,如磷酸盐缓冲液(PBS)或碳酸盐缓冲液,pH 控制在 7.2–8.5 范围,避免过酸或过碱环境导致蛋白变性或聚集。温度通常保持在室温或低温,以防止蛋白热失活及荧光染料降解。
反应过程中,CY3.5 与 HSA 的摩尔比需合理控制,以调节标记密度,避免过度标记造成蛋白聚集或溶解性下降。反应时间一般为数小时至过夜,根据蛋白浓度和染料浓度调整,确保充分反应并获得均一标记。为防止副反应或非特异性结合,可在反应体系中加入适量缓冲盐,同时保持轻柔搅拌以保证蛋白均匀分散。
反应完成后,需要对标记产物进行纯化,以去除未反应的 CY3.5 染料及小分子副产物。常用方法包括透析、凝胶过滤或离心过滤柱分离,最终获得纯净、荧光均一的 CY3.5-HSA。纯化后的分子在水溶液中表现出良好分散性和稳定性,荧光信号均匀且可重复检测,可用于细胞摄取实验、药物载体功能化及材料表面结合研究。通过荧光信号的可控性,可以监测蛋白在复合体系中的分布、结合效率及迁移行为,为蛋白质行为分析和实验设计提供可靠数据支持。
总体而言,CY3.5-HSA 的反应条件包括温和缓冲体系、适宜的 pH 范围、控制摩尔比及反应时间、低温操作以及产物纯化步骤。通过这些条件,可获得稳定、功能完整且荧光均一的标记蛋白,使其在生物体系、材料研究及化学实验中兼具光学追踪能力和化学活性,为蛋白质行为观察、载体体系研究及功能化实验提供可靠实验工具和数据支持。
产品名称:CY3.5-HSA
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09




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