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CY3.5-OVA,CY3.5标记卵清蛋白的反应位点
发布时间:2025-12-03     作者:axc   分享到:

CY3.5-OVA,CY3.5标记卵清蛋白的反应位点

CY3.5-OVA 是在卵清蛋白(Ovalbumin, OVA)分子上引入 CY3.5 荧光基团后的衍生物,用于实现蛋白质在溶液、材料及生物体系中的可视化。OVA 是一种单链糖蛋白,分子量约 45 kDa,含有丰富的赖氨酸侧链氨基和 N 端氨基,可作为荧光标记的反应位点。天然 OVA 缺乏稳定可观测的荧光信号,难以在实验中追踪蛋白分布、结合及迁移行为。通过 CY3.5 标记,蛋白分子获得稳定的荧光信号,可在共聚焦显微镜、流式分析及材料表面功能化研究中实现可视化追踪,从而研究蛋白在微环境中的行为和与其他分子的相互作用。

CY3.5-OVA 的制备通常通过 CY3.5 活化衍生物与 OVA 中暴露的氨基进行共价结合。常用的活化试剂为 CY3.5-NHS 酯,其羧基经过活化形成高亲电性的 N-羟基琥珀酰亚胺酯,可与 OVA 中赖氨酸侧链氨基或 N 端氨基发生亲核加成生成稳定的酰胺键。反应一般在温和缓冲体系中进行,pH 控制在 7–8.5,以保证蛋白构象和功能完整,温度保持在室温或低温以防止蛋白失活或聚集。通过调控 CY3.5 与 OVA 的摩尔比和反应时间,可获得均一标记且荧光强度可控的产物。

纯化 CY3.5-OVA 是确保荧光均一性和实验可靠性的关键步骤。常用方法包括透析、凝胶过滤或超滤膜分离,以去除未反应的 CY3.5 染料及小分子副产物。透析可通过半透膜将小分子杂质排出,而保留荧光标记的 OVA;凝胶过滤利用分子大小差异实现分离,适合在实验室条件下快速获得纯化产物。纯化后的 CY3.5-OVA 在水溶液或缓冲液中表现出良好分散性和稳定性,荧光信号均匀且强度适中,可直接用于后续实验。

表征 CY3.5-OVA 包括确认标记效率、分子完整性和荧光性质。常用方法有紫外可见光谱(UV-Vis)分析、荧光光谱测定及 SDS-PAGE 电泳。紫外可见光谱可用于确认 CY3.5 的吸收峰及蛋白浓度,荧光光谱可评估标记的荧光强度和稳定性,SDS-PAGE 可用于检测蛋白分子是否发生降解或聚集,同时通过荧光扫描可确认荧光染料与蛋白的共价结合。进一步可采用动态光散射(DLS)或质谱分析评估分子大小分布和标记分布,保证产物均一性和功能完整性。

总体而言,CY3.5-OVA 将卵清蛋白的蛋白骨架和氨基反应位点与 CY3.5 荧光标记结合,使分子在生物体系、材料体系及化学实验中兼具可视化能力和化学功能性。通过温和标记条件、有效纯化和多方法表征,可获得稳定、均一的标记蛋白,为细胞研究、材料功能化、复合体系构建及蛋白行为追踪提供可靠实验工具和数据支持。

产品名称:CY3.5-OVA 

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

CY3.5-OVA

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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