CY3.5-Streptavidin，CY3.5标记链霉亲和素的化学反应原理

CY3.5-Streptavidin是一种将CY3.5荧光染料与链霉亲和素（Streptavidin, SA）偶联的功能化分子，用于生物分子标记、可视化追踪和荧光成像研究。链霉亲和素是一种来源于放线菌的四聚体蛋白，具有与生物素（Biotin）极高亲和力的特性，可稳定结合生物素化分子而不受温度和pH显著影响。在生物分析、免疫检测和分子追踪中，Streptavidin作为高亲和力平台发挥重要作用。通过与CY3.5荧光染料偶联，标记后的分子不仅保留了生物素结合功能，同时具备可观测的远红光荧光信号，实现了荧光标记和功能整合。

CY3.5是一种远红光荧光染料，具有高量子产率、良好光稳定性和低背景信号，其激发波长通常在550至570纳米，发射波长在570至590纳米。CY3.5-Streptavidin偶联通过染料活性官能团（如NHS酯或马来酰亚胺）与Streptavidin蛋白分子中的赖氨酸氨基或巯基进行共价结合，形成稳定的标记产物。偶联反应在温和缓冲体系下进行（通常pH 7.0-8.0），以保护蛋白质构象稳定，同时保证荧光染料性能不受破坏。

在化学反应原理上，CY3.5-Streptavidin偶联主要依赖亲核取代或Michael加成反应。以NHS酯偶联为例，CY3.5上的NHS酯碳原子为亲电中心，Streptavidin赖氨酸残基氨基作为亲核试剂攻击该碳原子，生成稳定的酰胺键，同时释放N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）离去。该反应条件温和，反应速度适中，能够选择性标记蛋白表面氨基而不破坏蛋白核心结构。若采用马来酰亚胺官能团，反应则以蛋白巯基为亲核中心，通过Michael加成形成稳定的硫醚键，实现特异性标记。无论采用哪种官能团，偶联反应均可在水相缓冲液中完成，避免有机溶剂对蛋白质构象的影响。

CY3.5-Streptavidin偶联设计还考虑了空间与功能整合问题。柔性连接链将染料与蛋白表面隔开，既降低了荧光猝灭，又保证生物素结合口袋的空间不受阻碍，保持Streptavidin的高亲和力。偶联后的分子兼具荧光信号和蛋白功能，能够在免疫标记、亲和捕获和分子追踪中发挥作用。例如，CY3.5-Streptavidin可用于标记生物素化抗体、寡核苷酸或多糖，通过荧光信号观察分子分布和结合状态。

在实验应用中，CY3.5-Streptavidin提供可视化的标记方案，可用于显微成像、流式细胞分析及生物传感器构建。荧光信号使分子追踪直观可靠，远红光发射减少生物背景干扰，适合多通道成像和长期观察。化学偶联的稳定性保证了在复杂生物体系中保持标记完整，荧光信号与生物素结合能力同步发挥作用。

实验操作中，为确保偶联效率和蛋白功能保持，反应需在中性或弱碱性缓冲液中进行，并在避光条件下操作，防止CY3.5光漂白。偶联完成后，可通过透析、凝胶过滤或色谱去除未反应染料，保证产物纯度和功能特异性。标记效率和蛋白结合活性可通过荧光测定和生物素结合实验进行验证，确保CY3.5-Streptavidin在应用中稳定可靠。

总之，CY3.5-Streptavidin是一种将CY3.5荧光染料与Streptavidin蛋白共价结合的功能化分子。通过NHS酯或马来酰亚胺与蛋白表面氨基或巯基的亲核反应形成稳定共价键，偶联后的分子兼具荧光成像能力和生物素结合功能。其化学反应原理保证高选择性和温和条件，结合空间设计优化荧光性能与蛋白活性，为生物分子标记、分子追踪和亲和捕获实验提供了高效、可靠的工具。

产品名称：CY3.5-Streptavidin

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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