Sulfo-CY5-MAL，CY5-马来酰亚胺的反应原理

Sulfo-CY5-MAL是一种以CY5荧光染料为核心，并在末端引入马来酰亚胺（Maleimide）官能团的衍生物。CY5属于类瑜珈染料（cyanine dyes）家族，核心结构为多共轭碳链连接的氮取代吡啶或吡咯环，吸收峰约在650 nm左右，发射峰约在670 nm，具有稳定的可见光荧光信号。Sulfo-CY5-MAL通过在分子结构中引入亲水磺酸基（–SO₃⁻），提高水溶性，增强其在水溶液或缓冲体系中的分散性和生物兼容性。同时，马来酰亚胺末端为分子提供了高反应活性，使其可与巯基（–SH）含量丰富的生物分子（如半胱氨酸残基）发生选择性共价偶联反应。

Sulfo-CY5-MAL兼具近红外荧光性能和化学反应活性，广泛应用于蛋白质、抗体、多肽标记以及功能化纳米材料构建。在生物体系中，亲水性磺酸基确保染料均匀分散，减少非特异性吸附，而马来酰亚胺则通过高选择性巯基反应实现稳定共价连接。

反应条件

1. 反应原理
   马来酰亚胺与自由巯基（–SH）通过迈克尔加成（Michael addition）反应形成稳定的硫醚键（–S–C–），反应快速、高效，并且在温和条件下即可完成。此反应高度选择性，优先与游离巯基结合，而对氨基或羧基等其他官能团反应性较低，因此适合在复杂生物体系中操作。

2. pH条件

• 最适宜的反应pH为6.5–7.5。

• pH过低会降低巯基的亲核性，降低反应速率；pH过高则可能引起马来酰亚胺水解，生成不活泼的马来酰酸盐，从而降低偶联效率。

3. 溶剂与缓冲体系

• 常用缓冲体系包括PBS（磷酸盐缓冲液）、HEPES或Tris，浓度一般为10–50 mM。

• 避免使用含巯基的缓冲剂（如DTT、β-巯基乙醇），以免与马来酰亚胺竞争反应。

• 染料溶解可在缓冲液中直接溶解，水溶性磺酸基有助于高浓度溶解而不产生沉淀。

4. 温度与反应时间

• 反应可在室温下进行，通常完成时间为1–2小时。

• 温度过高可能导致染料降解或马来酰亚胺水解，因此通常保持室温或4°C条件下进行长时间标记。

5. 摩尔比

• 染料与巯基的摩尔比通常略过量（如1.2–2倍），确保标记效率，同时避免多余未反应染料过多干扰后续纯化。

6. 纯化方法

• 反应完成后，通过凝胶过滤、透析或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的Sulfo-CY5-MAL。

• 产物为巯基偶联的染料-蛋白复合物，硫醚键稳定，可在后续生物实验中长期保持荧光信号。

产品名称：Sulfo-CY5-MAL

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

CY3标记的血清前白蛋白 Cy3-labeled血清前白蛋白，PA，

CY3标记的叶酸脂质体 Cy3-叶酸脂质体

CY3标记的胰岛素 CY3-Insulin

CY3标记的胰岛素，Ins， Cy3-Insulin，Ins，

CY3标记的右旋糖酐 CY3-Ficoll

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09