Sulfo-CY5-Alkyne，磺化基标记的花青素CY5荧光基团的合成过程研究

Sulfo-CY5-Alkyne是一种将CY5近红外荧光染料进行磺化修饰并引入炔基（–C≡CH）官能团的水溶性衍生物。CY5染料属于类瑜珈染料（cyanine dyes）家族，其核心由长共轭碳链连接的氮取代吡啶或吡咯环组成，具有约650–670 nm的吸收峰和670–690 nm的发射峰，提供稳定的近红外荧光信号。磺酸基（–SO₃⁻）修饰增强了水溶性和分散性，降低了染料在水溶液或生物体系中的非特异性吸附，同时提高化学稳定性和生物兼容性。

炔基末端提供高选择性的化学反应位点，可与叠氮基分子通过点击化学（Cu(I)-催化叠氮-炔环加成反应，CuAAC）实现共价偶联。Sulfo-CY5-Alkyne兼具光学信号和化学功能化能力，可用于蛋白质、多肽、核酸及纳米材料的标记与功能化，是荧光探针和生物功能化研究中的重要工具。

合成过程研究

1. 原料与反应设计

• 原料通常为CY5染料的羧基衍生物（CY5-COOH）或活化酯（如CY5-NHS）。

• 磺化修饰可在染料合成中或末端官能团引入时完成，以提高水溶性。

• 炔基引入通过含炔基的胺或醇进行酰胺化或酯化反应实现，为后续点击化学提供活性位点。

2. 合成步骤概述

• 在染料核心或侧链引入磺酸基，提高水溶性和分散性。

• 可通过磺化试剂（如氯磺酸或磺酰氯衍生物）进行选择性反应，确保染料核心结构完整。

• 向活化的CY5-NHS中加入含炔基的胺（如propargylamine），在室温或轻微加热条件下反应，形成CY5-炔基酰胺。

• 控制反应pH（一般pH 7–8）可避免染料降解，并提高偶联效率。

• 将CY5-COOH在有机溶剂中通过碳二亚胺（如EDC）与NHS反应形成CY5-NHS中间体，提高羧基活性。

1. 染料活化：

2. 炔基引入：

3. 磺化修饰：

3. 反应条件优化

• 溶剂选择：有机溶剂（如DMF、DMSO）可溶解染料和炔基胺，促进反应均匀。

• 温度与时间：室温或35–40℃温和条件，反应数小时至过夜，避免染料降解。

• pH调控：缓冲液或弱碱条件可提高胺与NHS酯反应效率，同时保持染料稳定。

4. 纯化方法

• 反应后混合物含有未反应起始物、副产物及目标产物。

• 常用透析、凝胶过滤或反相高效液相色谱（RP-HPLC）分离纯化。

• 通过紫外-可见吸收和荧光检测确认目标产物收集。

5. 表征方法

• UV-Vis和荧光光谱：确认CY5染料吸收和发射峰保持完整，评估荧光性能。

• 质谱（MS）：确定分子量与结构，验证炔基和磺酸基引入情况。

• 核磁共振（NMR）：分析炔基的化学位点和磺化修饰位置。

• 水溶性及稳定性测试：溶解于水或缓冲液，观察荧光强度随时间变化，验证分子稳定性。

产品名称：Sulfo-CY5-Alkyne

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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