产品名称:Fluorescein-PEG-Mal的偶联反应机制与操作规范
1. 偶联反应机制与操作规范
反应原理:Mal通过迈克尔加成与巯基共价结合,形成耐水解硫醚键;若荧光素含羧基,可通过EDC/NHS活化后与PEG氨基反应生成酰胺键。
操作步骤:
储存:-20℃避光干燥保存,分装小份避免反复冻融;溶液现配现用,避免水解。
反应:按1:1-5:1摩尔比(Mal:巯基)混合,在pH 6.5-7.5的HEPES/PBS缓冲液中避光反应1-2小时;惰性气体(如氮气)保护防止氧化。
纯化:透析(截留分子量3.5 kDa)或超滤(10 kDa截留)去除游离试剂;HPLC/SDS-PAGE验证偶联效率。
2. 应用场景与功能扩展
生物分子标记:特异标记抗体/蛋白质的半胱氨酸残基,用于免疫荧光、流式细胞术、单分子追踪及ELISA检测;适配多色实验(如与Cy5/Alexa Fluor联用)。
纳米材料功能化:修饰脂质体/金纳米粒表面,偶联靶向配体(如叶酸/抗体),构建癌症靶向载体;整合荧光探针与治疗性分子,实现“靶向-成像-治疗”一体化。
材料科学与表面工程:改善水凝胶/支架亲水性及细胞相容性;外泌体/细胞膜生物素化,构建递送平台。
3. 生物安全性与质量控制
安全性评估:常规剂量下低毒,高浓度可能引发代谢干扰;PEG链经肾脏代谢,荧光素经肝代谢;需通过MTT法验证细胞毒性,监测肝肾功能及蓄积效应。
质量控制:荧光光谱验证发射波长与强度;HPLC/MALDI-TOF-MS验证分子量与纯度;生物活性通过受体结合实验(如ELISA)验证。

关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。
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