Quasar 705 T Amidite，Quasar 705 胸腺嘧啶磷酰胺衍生物的反应步骤

Quasar 705 T Amidite（中文名称：Quasar 705 胸腺嘧啶磷酰胺衍生物）是一种用于寡核苷酸合成的荧光标记核苷中间体。其核心由 Quasar 705 荧光染料偶联至胸腺嘧啶核苷形成，通过柔性 C6 或类似链段连接，同时末端含有 2-氰乙基二异丙基磷酰胺（phosphoramidite）活性基团，可在固相寡核苷酸合成中与核苷羟基高效偶联。Quasar 705 是一种长波段近红外荧光染料，吸收峰约在 690–705 nm，发射峰约在 720 nm 附近，适合用于多重荧光实验、分子示踪和生物成像。

该化合物的设计特点包括：

• 模块化结构：染料、柔性链和核苷结构分离，减少分子间干扰和荧光淬灭。

• 活性官能团：末端磷酰胺保证高效偶联。

• 光学稳定性：荧光信号强度高、光漂白低，适合长时间成像。

二、反应步骤

Quasar 705 T Amidite 的合成及寡核苷酸引入步骤可以分为三个主要阶段：染料功能化、核苷偶联和磷酰化活化。

1. 荧光染料功能化

1. 染料活化
   Quasar 705 荧光染料通过羧基或氨基官能团进行活化，常采用 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）或其他活化剂生成活性中间体。

2. 偶联柔性链
   在活化中间体上引入柔性 C6 链或类似 spacer，使染料与核苷间保持空间隔离，降低荧光淬灭风险。柔性链提供了结构调节和化学反应位点。

2. 核苷偶联

1. 选择核苷模板
   以胸腺嘧啶核苷为基础，5'-羟基端可与荧光染料通过柔性链偶联，保持核酸链的化学兼容性。

2. 形成染料-核苷偶联物
   在有机溶剂中（如 DMF 或 DCM），利用碱性催化剂（如 DIPEA）促进氨基或羟基与活化染料反应。形成稳定的共价键，使 Quasar 705 与胸腺嘧啶核苷偶联完成。反应过程中需要控制温度和水分，防止染料降解或副反应生成。

3. 磷酰化活化（Amidite 化）

1. 磷酰化反应
   将偶联好的染料-核苷化合物通过磷酰化剂（如二异丙基氯膦酰胺，Diisopropylchlorophosphoramidite）处理，使 5'-羟基转化为 2-氰乙基二异丙基磷酰胺衍生物。

2. 反应条件

• 溶剂：干燥二氯甲烷或 DMF

• 温度：0–5°C，控制副反应

• 助剂：碱性条件（DIPEA）捕获 HCl

3. 产物稳定化
   生成 Quasar 705 T Amidite 后，应在干燥、避光条件下储存，以防止磷酰胺水解和染料光降解。

4. 固相寡核苷酸合成中的应用

1. 偶联到寡核苷酸链
   在固相合成中，Quasar 705 T Amidite 的末端磷酰胺与寡核苷酸链 5'-羟基反应形成磷酰胺中间体。

2. 氧化稳定化
   使用氧化剂（如 I₂）将中间体氧化为稳定的磷酸二酯键，完成染料标记的寡核苷酸合成。

3. 去保护和洗脱
   完成固相合成后，去除保护基并洗脱，即可得到带有 Quasar 705 荧光标记的寡核苷酸，适用于分子示踪、荧光定量及细胞成像实验。

产品名称：Quasar 705 T Amidite

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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