BHQ-1 Succinimidyl Ester,BHQ-1 琥珀酰亚胺酯的反应步骤
BHQ-1 Succinimidyl Ester(中文名称:BHQ-1 琥珀酰亚胺酯)是一种广泛用于寡核苷酸、蛋白质及多肽标记的非荧光淬灭剂。BHQ-1(Black Hole Quencher-1)通过其琥珀酰亚胺酯末端与目标分子的氨基(如蛋白质赖氨酸侧链或寡核苷酸末端氨基)发生高效共价偶联,实现荧光淬灭或 FRET 系统中能量吸收的功能。该化合物吸收范围广泛,可有效淬灭绿色至橙色荧光染料的能量而不自身发光,常用于荧光探针、分子信号开关以及实时 PCR 和分子检测系统。
BHQ-1 Succinimidyl Ester 的反应步骤通常包括活化、偶联和纯化三大环节。首先是反应物准备阶段。BHQ-1 Succinimidyl Ester 本身具有高度活性的 NHS 酯末端,需要溶解在干燥、无水的有机溶剂(如 DMSO 或 DMF)中以保持其活性,同时避免水分引发水解。目标分子如蛋白质或寡核苷酸末端氨基应处于缓冲体系中,pH 通常控制在 7.5–8.5,以保持氨基的亲核活性并保证反应效率,同时避免强酸或强碱环境对 NHS 酯的降解。
第二步是偶联反应。NHS 酯与目标分子上的伯氨基发生亲核取代反应,生成稳定的酰胺键。反应过程中,BHQ-1 的琥珀酰亚胺酯末端首先被氨基亲核攻击,形成中间四面体过渡态,然后释放 N-羟基琥珀酰胺(NHS)离去基,完成共价连接。该步骤通常在室温下进行,反应时间根据目标分子浓度和体系条件而定,通常在 30 分钟至数小时之间。柔性连接结构使得 BHQ-1 在偶联过程中不会对目标分子造成显著空间阻碍,从而保持其生物活性。
第三步是纯化与质量控制。偶联反应完成后,需去除未反应的 BHQ-1 NHS 酯和副产物,以获得高纯度的标记分子。常用纯化方法包括高效液相色谱(HPLC)、透析或凝胶过滤。纯化后的产物可通过 UV-Vis 吸收光谱和荧光光谱进行验证,确保 BHQ-1 的淬灭功能有效,并确认标记效率和分子完整性。纯化后的 BHQ-1 标记物应低温避光储存,以防止光降解和水解。
BHQ-1 Succinimidyl Ester 的反应特点在于高效、可控和选择性强。其 NHS 酯末端反应性高,对伯氨基具有专一性,使标记过程能够在温和条件下实现高产率偶联。酰胺键稳定,不易水解或断裂,保证标记分子在实验和体内应用中的稳定性。由于 BHQ-1 自身不发光,它能够在 FRET 或分子探针系统中吸收荧光染料的能量,实现信号调控而不干扰检测。
在应用中,BHQ-1 Succinimidyl Ester 可用于构建荧光探针、实时 PCR 探针(TaqMan 探针)、分子开关、分子信号放大系统以及多色荧光成像系统。其反应步骤简单、条件温和、效率高,结合化学稳定性和生物相容性,使其在生命科学研究和生物分析中成为重要的化学工具。
产品名称:BHQ-1 Succinimidyl Ester
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09




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