AF532标记的α-Bungarotoxin，Alexa Fluor 532 标记的 α-银环蛇蛋白素的制备方法

AF532标记的α-Bungarotoxin中文名称为Alexa Fluor 532 标记的 α-银环蛇蛋白素，也可称作Alexa Fluor 532 荧光标记 α-Bungarotoxin。α-Bungarotoxin是一种来源于银环蛇体液的蛋白质分子，能够特异性结合烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR），常用于神经科学、细胞生物学以及受体定位研究；Alexa Fluor 532（AF532）是一种橙红色荧光染料，激发波长约为532 nm，发射波长约为554 nm，具有良好的光稳定性和较高的荧光强度。AF532标记的α-Bungarotoxin通常采用荧光染料活性酯与蛋白分子中的氨基进行化学偶联的方法制备。首先，需要获得高纯度的α-Bungarotoxin蛋白，一般通过蛇体液粗提物经凝胶过滤和高效液相色谱（HPLC）纯化得到，纯度需大于95%，以确保蛋白的结合活性。纯化后的α-Bungarotoxin溶解于无胺干扰的缓冲体系中，如0.1 mol/L碳酸氢钠缓冲液（pH 8.3），该条件有利于蛋白分子赖氨酸残基的暴露，使其能够参与偶联反应。随后，将适量Alexa Fluor 532 NHS酯溶解于无水二甲基亚砜（DMSO）中，按一定摩尔比（染料∶蛋白约3∶1至10∶1）缓慢加入蛋白溶液中，反应过程中需避光并轻轻混匀，可在室温或4℃条件下反应1至2小时，以保证染料能够与蛋白形成稳定共价键。反应完成后，通过脱盐或纯化方法去除未结合的游离染料，常用的纯化手段包括Sephadex G-25凝胶过滤、透析或超滤离心，收集含有荧光标记蛋白的组分。随后利用紫外-可见分光光度计测定280 nm（蛋白吸收峰）和532 nm（染料吸收峰）的吸光度，从而计算标记度（DOL，degree of labeling），通常控制每个α-Bungarotoxin分子结合1至2个AF532分子，以兼顾荧光信号强度和受体结合能力。纯化后的AF532-α-Bungarotoxin可用适宜缓冲液（如PBS）重悬，分装避光保存于-20℃或-80℃以延长储存稳定性。在使用前可通过细胞或组织染色实验验证其对烟碱型乙酰胆碱受体的结合能力及荧光特性，从而确保其在神经受体定位、受体动态监测及相关实验研究中的可靠性和可重复性。整个制备过程需注意避光、控制pH条件和反应时间，以保证标记产物的稳定性和功能完整性，同时在实验过程中应根据实验设计调整染料与蛋白的摩尔比、反应温度及纯化方法，以获得适用于具体实验条件的标记试剂。

产品名称：AF532标记的α-Bungarotoxin

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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