AF488-α-Bungarotoxin,Alexa Fluor 488 标记的 α-银环蛇蛋白素的结构合成
AF488-α-Bungarotoxin的中文名称为Alexa Fluor 488 标记的 α-银环蛇蛋白素,也可称作Alexa Fluor 488 荧光标记 α-Bungarotoxin。其中,α-Bungarotoxin是一种来源于银环蛇体液的蛋白质分子,能够特异性结合烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR),常用于神经科学、细胞生物学及受体定位研究;Alexa Fluor 488(AF488)是一种绿色荧光染料,激发波长约为495 nm,发射波长约为519 nm,具有较强的光稳定性和明亮的荧光信号。AF488-α-Bungarotoxin是一种典型的荧光标记蛋白,其结构由α-Bungarotoxin蛋白骨架与Alexa Fluor 488染料通过共价偶联形成,偶联部位通常是蛋白分子中可反应的赖氨酸残基的ε-氨基,通过染料的活性酯与蛋白形成稳定的酰胺键实现荧光标记。其合成过程主要包括蛋白的纯化、荧光染料活性化、偶联反应以及产物纯化几个步骤。首先,从银环蛇体液中提取粗蛋白,通过凝胶过滤、高效液相色谱(HPLC)等方法获得高纯度的α-Bungarotoxin蛋白,纯度一般要求大于95%,以保证结合活性。随后,将纯化蛋白溶解于无胺缓冲体系中,如0.1 mol/L碳酸氢钠缓冲液(pH 8.3),以利于蛋白赖氨酸残基的暴露和反应。与此同时,将Alexa Fluor 488 NHS酯溶解于无水有机溶剂如DMSO中,按一定摩尔比(染料∶蛋白约3∶1至10∶1)缓慢加入蛋白溶液中,反应过程中需避光轻轻混匀,可在室温或4℃条件下反应1至2小时,以确保荧光染料与蛋白形成稳定酰胺键。偶联反应完成后,需要通过脱盐或纯化方法去除未结合的游离染料,常用方法包括Sephadex G-25凝胶过滤、透析或超滤离心,收集含荧光标记蛋白的组分。随后,通过紫外-可见分光光度计测定280 nm(蛋白吸收峰)和488 nm(染料吸收峰)的吸光值,计算标记度(DOL,degree of labeling),通常控制每个α-Bungarotoxin分子结合1至2个AF488分子,以兼顾荧光强度和受体结合能力。纯化后的AF488-α-Bungarotoxin可用适宜缓冲液如PBS重悬,分装避光保存于-20℃或-80℃,在使用前可通过细胞或组织染色实验验证其对烟碱型乙酰胆碱受体的结合能力和荧光特性。整个标记过程中需注意保持反应体系干燥、避光和控制pH值,以保证标记产物的稳定性和功能完整性。AF488-α-Bungarotoxin的结构特点是蛋白质骨架为核心,荧光染料通过化学偶联稳固连接在蛋白表面,形成兼具生物识别能力和荧光信号输出的双功能分子
产品名称:AF488-α-Bungarotoxin
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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